研究表明，人体内天然存在的抗角蛋白自身抗体（anti-keratin auto antibody，AK auto Ab）是维持机体免疫状态平衡的重要成员。一些病理情况下（如银屑病、接触性皮炎等），AK auto Ab的存在有利于限制病情的进展，促进损伤的修复，对机体具有有益的保护作用。动物实验和体外研究都提示当机体内AK auto Ab水平低下时人为补充抗角蛋白抗体有可能成为该类疾病新的治疗措施。为此我们尝试采取基因工程的方法，利用噬菌体抗体库等技术制备具有高特异性和高亲和力的人源性抗角蛋白抗体。 半合成噬菌体抗体库库容4.0×10⁸，经扩增后滴度为1×10¹⁴cfu／ml。以人表皮角蛋白为抗原对其进行4轮“亲和吸附—洗脱—扩增”筛选，挑取单集落培养表达噬菌体抗体并鉴定其与角蛋白结合的活性和特异性；初步获得的阳性克隆经可变区基因指纹分析确定其基因种类的异同，选择不同的克隆以内切酶去除载体上的基因Ⅲ，表达可溶性Fab段，进行进一步鉴定。亲和力成熟采用链替换技术，分离未经免疫的正常人淋巴细胞提取RNA，RT-PCR扩增K轻链基因和IgG／IgM重链Fd段基因分别构建轻链库和重链库。先以筛选所获克隆的重链与轻链库随机搭配进行轻链替换，对形成的换链库采用解离速率筛选法（off-rate selection）选取亲和力提高的克隆；然后再将获得的轻链基因与重链库基因重组进行重链替换，筛选亲和力进一步提高的克隆，并进行抗体抗原结合活性及特异性检测、亲和力测定和可变区基因序列比较分析。 通过筛选获得了4个能与角蛋白特异结合的噬菌体抗体克