游离漆酶不稳定,对周围环境较为敏感,难以重复利用,酶的固定化技术是近些年来解决以上问题的有效手段。本课题使用具有良好生物兼容性的330弱碱性环氧系阴离子交换树脂（简称330树脂）为载体,采用戊二醛作为交联剂固定化漆酶,研究了载体对漆酶的固定化效果。通过单因素实验确定漆酶的最佳单因素固定化条件:交联剂戊二醛浓度为1%、交联时间为8 h、交联温度为30℃、固定化pH为3.0、酶稀释倍数为100、给酶量体积为10 ml、PBS离子浓度为0.1 mol/L、固定化时间为5 h,固定温度为25℃。将响应面法（RSM）应用到漆酶固定化条件优化体系中,考察固定化过程中多因素间的交互影响,结果表明:酶稀释倍数是影响固定化酶活的首要因素,并且与其他2个主要影响因素交互作用明显。优化条件下验证实验结果为:固定化酶活平均结果为11.26 U/g,与模型的理论值11.99 U/g的差值仅为0.73 U/g,该模型可以较好地反映出利用330树脂固定化漆酶条件。以ABTS作为底物对固定化漆酶与游离漆酶酶学性质进行了比较:固定化漆酶在pH=3-5的环境中保存1 h,相对酶活仍然保持初始酶活的80%以上,而游离漆酶则相降至70%左右;固定化漆酶在25℃-45℃下进行固定化漆酶的热稳定性测试,随着时间延长,固定化漆酶的活性下降速率明显减缓;循环使用10批次的固定化漆酶的酶活回收达到45%以上。固定化漆酶对刚果红的降解最适pH值为6.0,向偏中性方向移动;刚果红浓度为10 mg/L时,脱色效果最好,脱色率可达到70%;连续使用5次后固定化酶活还能够保留在40%以上。多数金属离子对酶活的抑制作用不太明显,Fe²⁺对酶活具有明显抑制作用,而Cu²⁺对酶活有一定的促进作用;除Fe²⁺外,其他离子的存在对刚果红的脱色率没有太大影响;适当增加Cu²⁺和Cr⁶⁺的浓度,脱色率有一定程度的升高;加入混合金属离子后酶活大约降低了13%。