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本研究采用重叠延伸PCR方法拼接合成含有编码Abaecin的基因(ABA),采用大肠杆菌-枯草杆菌穿梭表达系统分泌表达了活性抗菌肽Abaecin,研究了表达产物rAbaecin的体外抗菌效果、rAbaecin对肉鸡生长性能、免疫功能的影响。主要研究结果如下:1.采用重叠延伸PCR技术,根据枯草杆菌168基因组序列中1105268 -1105568序列(Genebank登录号:AL009126.3)合成枯草杆菌素信号肽;根据Abaecin序列(Genebank登录号:LOC406144),合成Abaecin编码基因,然后再通过两片段拼接的方法克隆出全长ABA基因,电泳分析显示,其条带分子量大小与理论分子量(189bp)大小相符,ABA测序的结果表明,其核苷酸序列与Genebank中报道的目的基因的同源性达98%以上,证实已正确克隆Abaecin目的基因。2.构建大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体pGplt,利用基因重组的方法将ABA构建入穿梭表达载体pGplt得到重组表达质粒pGplt-ABA,转入枯草芽孢杆菌1A747中分泌表达。SDS-PAGE检测结果表明,表达产物中有一分子量为3.9kD左右的特异性条带,进一步进行western blot检测,在特异性条带对应位置3.9kD处也有相应条带,与理论值相吻合,结果显示,ABA在枯草芽孢杆菌中表达成功。3.经过体外抑菌试验,结果表明,产物rAbaecin有活性,对革兰氏阴性菌大肠杆菌k88有很好的抑菌活性。生物活性稳定性鉴定如下:抗菌肽Abaecin经过60℃处理15min,抑菌圈活性变化不大,抑菌率保持在95%左右;90～100℃处理10min,抑菌活性明显减小。抗菌肽经不同pH值处理,在pH为4～9中抗菌活性没有明显变化。在pH为2～4时抗菌活性明显减小,但可以达到60%以上。在不同的酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K)处理下仍能保持活性。4.经细胞毒性试验验证,rAbaecin对Caco-2模型和鸡肠道上皮细胞模型的细胞形态、细胞增殖和细胞通透性等均无影响。所以表达产物是安全的产品。5.日粮中添加不同水平的rAbaecin粗提品,能显著提高14、21d雏鸡的活重(p<0.05);显著降低36-42d雏鸡料重比(p<0.05);显著提高35d雏鸡的肠绒毛长度和绒毛长度/隐窝深度比值(p<0.05);对雏鸡肠道淀粉酶无不良影响;降低21、35d雏鸡肠道大肠杆菌数量;提高雏鸡35d肠道乳酸杆菌菌群数量,效果优于抗生素组。6.日粮中添加不同水平的重组rAbaecin粗提品,不影响免疫器官发育,促进T淋巴细胞转化,提高血清补体C3、C4和免疫球蛋白IgG含量,提高血清中溶菌酶含量。表明抗菌肽能够提高机体免疫力,总体效果优于抗生素。