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目的通过将rhBMP-2/PLGA缓释微球植入到激素性股骨头坏死模型的软骨下骨区域,来探讨髓芯减压联合rhBMP-2/PLGA缓释微球在治疗早期激素性股骨头缺血性坏中的作用及可能的机理,为临床应用缓释BMP治疗早期激素性股骨头坏死提供一定的理论依据。方法①采用W/O/W型复乳化-溶剂挥发技术制备rhBMP-2/PLGA缓释微球,并对微球的包封率和载药量,体外释放性质进行测定。异位成骨实验,检测rhBMP-2/PLGA缓释微球的成骨作用。②采用经典的兔激素性股骨头坏死模型制作方法制备模型:46只新西兰大耳白兔随机分成A、B、C、D 4组,A组为正常对照组10只,B组为模型组12只,C组为单纯髓芯减压组12只,D组为髓芯减压加rhBMP-2/PLGA缓释微球治疗组12只。B、C、D三组通过耳缘静脉注射马血清。首次应用马血清10 ml/kg,经兔耳缘静脉注射,间隔3周后,马血清减量为6 ml/kg经兔耳缘静脉再次注射;间隔2周后,耳缘静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠,按45 mg/kg连续3 d,每天注射1次。最后一次激素后每组处死一只实验动物检测造模情况。正常对照组动物常规饲养。③动物实验:于最后一次激素注射后对C、D两组实验动物行髓芯减压。D组髓芯减压后,植入含(rhBMP-2)3微克的rhBMP-2/PLGA缓释微球,并取大粗隆骨块填塞入口以防微球泄露;A、B组不予任何处置。术后12周处死动物对其进行大体观察、X线、HE染色及VEGF免疫组化染色,并进行统计学分析明确rhBMP-2/PLGA缓释微球对早期激素性股骨头缺血性坏死的作用和机理。结果1、制作的rhBMP-2/PLGA缓释微球对rhBMP-2的包封率为(37.52±4.31)%,微球载药率为(5.12±1.32)%,微球rhBMP-2的体外药物释放存在突释,7 d内释放的药物量超过40%,突释后进入缓慢释放期,大约90%的药物量于42 d内释放完全。2、成功制作早期激素性股骨头缺血性坏死模型:大体观察可见股骨头表面有少许充血带;X线片出现骨质疏松,骨质透光度较正常兔增加,HE染色可见软骨下骨出现骨坏死,软骨下血管减少,空骨陷窝数目增加。3、rhBMP-2/PLGA缓释微球对于早期激素性股骨头缺血性坏死的影响:(1)A、B、C、D四组动物股骨头均完整,肉眼未见表面塌陷。A组兔股骨头表面光滑、质硬,呈白色;B组兔股骨头表面出现红色充血带,皮质薄,色暗;C组股骨头呈淡白色,股骨头硬度介于A,B两组之间,D组股骨头未见红色充血带,股骨头表面光滑完整,骨质坚韧不易切凿接近正常。(2)X线片显示:B组X线片骨密度较A组显著降低,C组较B组好转但密度仍低于A组,D组骨密度较B组显著增加接近A组。(3)HE染色显示:D组空骨陷窝率接近正常。均有统计学意义(P<0.05)。(4)VEGF免疫组化结果显示: D组染色最深且颜色深于A组,D组动物免疫组化图片中棕黄色胞浆染色区满视野,染色强度显著高于其他组,统计分析结果差异明显有统计学意义(P<0.05)。(5)B组软骨下血管计数较A组显著减少,C组则比B组增多,D组较B组显著增多。差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、成功建立了激素性兔股骨头坏死模型。2、采用髓芯减压复合rhBMP-2/PLGA缓释微球法冶疗缺血性股骨头坏死是一可行的方法,为临床治疗股骨头坏死提供了一种新的思路和方法。