白兰（Michelia alba DC.）是我国南方广为种植常绿乔木,在亚热带地区种子稀少,有性繁殖率低。本研究拟通过对其芽的诱导和继代机理与技术研究,通过截顶处理,用高效液相色谱法测定白兰自然腋芽和组培芽体内源激素调控下的芽增殖和生长的变化规律,以适应未来规模化苗木生产的关键技术需求,为白兰组织培养体系的建立及其他树木的芽高效诱导和增殖提供参考和理论依据。主要结果如下:1.白兰自然芽内源激素的测定,截去顶芽42d后,植株上的腋芽萌发长至3 cm,内源ZT和IAA含量分别从164.78μg·gFW-1和8.76μg·gFW-1 升高到 175.43 μg·gFW-1 和 13.43 μg·gFW-1,内源 ZT 与 IAA比值从18.81减少到13.06。2.组织培养外植体的消毒,用0.1%的升汞溶液消毒为4 min时,成活率最高可达到48.89%。3.愈伤组织诱导,外植体选择植株顶芽部分或嫩茎段,配方为MS+ NAA 0.5 mg·L^-1 + IBA 1.5mg·L^-1 + 6-BA 1.5mg·L^-1+蔗糖 30 g·L^-1+琼脂7 g·L^-1诱导率高达86.67%。4.愈伤组织增殖培养,经筛选蔗糖浓度在30 g·L^-1时效果最好。配方选用 MS + NAA 0.5 mg·L^-1 + 6-BA 1.0 mg·L^-1 +KT 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7 g·L^-1可获得最高增殖率10.18%。愈伤组织增殖培养35 d后重量达到3.70 g,增量为3.35 g,且质量在0-21 d内变化明显,同时ZT、GA3、IAA呈上升趋势,培养21d后,增殖速率减缓。5.芽诱导最佳配方选择 MS+ NAA 0.5 mg·L^-1 + 6-BA 1.0 mg·L^-1 +蔗糖30 g·L^-1+琼脂7 g·L^-1诱导率最好为72.22%。用高效液相色谱法分析芽诱导中外源激素对内源激素的作用,固定6-BA浓度为0.5 mg·L^-1改变NAA浓度,发现外源NAA的添加对内源ZT和IAA都有促进作用。NAA浓度为0.5 mg·L^-1时内源ZT含量在28 d时达到峰值175.91 μg·gFW-1,此时芽诱导率为70.37%。当NAA浓度为1.0 mg·L^-1 时,IAA 增量最高为 2.90μg·gFW-1。固定 NAA 浓度为 0.5 mg·L^-1改变6-BA浓度,当6-BA浓度为2mg·L^-1时,内源ZT含量在28d时可达到最高为178.36μg·gFW-1,增量为13.51μg·gFW-1,此时芽诱导率为59.26%。但6-BA对IAA促进作用不强。6.芽增殖培养选用配方 B5 + NAA 0.05 mg·L^-1 + TDZ 0.05 mg·L^-1+蔗糖30g·L^-1+琼脂7g·L^-1可获最大增殖倍数2.78。影响芽增殖倍数各因素的主次关系为TDZ>NAA>培养基。增殖培养21d时,内源激素ZT含量达到峰值180.96 μM·gFW-1,内源IAA含量培养35 d后为11.76μg·gFW-1,表现平稳,二者比例从14.83升高到15.18。增殖过程中,新生芽体从7 d以后开始发生,21 d后迅速生长,到35 d时可达到1.0cm。相比与同等大小的白兰自然腋芽,增殖芽内源ZT含量较自然芽高6.16μg·gFW-1,IAA含量高1.17μg·gFW-1,ZT与IAA比值低了 1.1,且此时组培芽长势较弱,说明刚增殖出的小芽生长力不如自然芽,需进一步培养调整内源激素含量和比值,使芽体壮大。7.壮苗培养选用配方 MS + 6-BA 0.01 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7 g·L^-1可获最佳效果且苗高可达到3 cm左右。壮苗培养35 d后内源ZT含量达到180.22μg·gFW-1,增量为1.68μg·gFW-1,内源IAA含量达到14.40μg·gFW-1,增量为2.68μg·gFW-1。而二者比值从15.18降低到12.52。相比同等大小的自然腋芽,组培苗内源ZT含量高4.79μg·gFW-1,内源IAA含量高0.97μg·gFW-1,而ZT与IAA比值较自然腋芽低0.53。此时组培苗生长趋势更好,生长速度也更快,表现了壮苗培养的意义。8.将组培芽和自然芽生长过程分为1 cm、2 cm、3 cm,比较两者生长时间和内源激素。从诱导出芽体到长度为3 cm,组培芽需要49 d,自然芽需要42 d,但从1 cm生长到3 cm,组培芽比自然芽时间少7 d,所以芽体大量繁殖时,更能体现组培优势。从1cm到3 cm,组培芽和自然芽的内源ZT与IAA含量都呈升高趋势。3cm的组培芽和自然芽内源ZT含量分别为179.69μg·gFW-1和175.43 μg·gFW-1,自然芽增量更大为3.05 μg·gFW-1,内源IAA含量分别为11.76 μg·gFW-1和13.43μg-gFW-1,自然芽增量更大为2.84μg·gFW-1。内源ZT和IAA比值在芽体长度1-3 cm期间都呈下降趋势,2 cm时,组培芽和自然芽ZT/IAA相近为14.88和14.29,3 cm时,组培芽ZT/IAA高于自然芽1.29,反映组培芽的生长速度和趋势从达到自然芽到优于自然芽。