骆驼刺茎枝多糖提取工艺、理化性质及抗氧化活性研究

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目的:  优选骆驼刺茎枝多糖最佳提取工艺,研究骆驼刺茎枝多糖理化性质,考察骆驼刺多糖体内外抗氧化活性,为扩大民族用药骆驼刺药用部位提供理论基础与科学依据。  方法:  1.首先采用单因素方法对骆驼刺茎枝多糖的提取时间、提取温度、提取次数、醇沉时间、醇沉浓度等提取工艺进行筛选,然后采用正交实验方法对提取温度、提取时间、提取次数、醇沉浓度进行考察,优选骆驼刺茎枝多糖最佳提取工艺。  2.采用苯酚-硫酸法测定骆驼刺茎枝多糖的糖含量,Bradford法测定骆驼刺茎枝粗多糖的蛋白含量,咔唑-硫酸法测定骆驼刺茎枝多糖的糖醛酸含量,酸水解、乙酰化联合气相法(GC)测定骆驼刺茎枝多糖的单糖组成。  3.采用化学法,从对三价铁离子的还原能力,对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除能力四方面考察骆驼刺茎枝多糖的体外抗氧化活性。  4.采用正常小鼠及腹腔注射半乳糖诱导的衰老模型小鼠,通过测定小鼠脾、胸腺等脏器指数,小鼠血清中SOD、MDA、TABS活性,评价骆驼刺茎枝多糖的体内抗氧化活性。  结果:  1.单因素及正交实验结果显示骆驼刺茎枝多糖最优提取工艺为:水浴温度80℃,提取时间1h,提取次数3次,醇沉浓度75%。  2.紫外扫描、红外光谱显示骆驼刺茎枝提取物具有多糖的特征吸收峰,糖含量为73.2%,糖醛酸含量占总糖含量的26.2%,气相色谱显示骆驼刺茎枝多糖主要由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖醛酸等8种单糖组成,其相对摩尔比为1.05∶1.00∶1.25∶0.52∶3.05∶1.31∶0.47∶4.78。  3.骆驼刺茎枝多糖的体外抗氧化活性结果显示,其对三价铁离子具有一定的还原能力,可清除DPPH自由基、羟自由基,且清除能力随多糖浓度的升高而增大,对超氧阴离子清除作用不明显。  4.骆驼刺茎枝多糖对正常及衰老小鼠都具有一定的抗氧化活性,与正常及衰老模型组相比,骆驼刺茎枝多糖各剂量组正常小鼠及衰老模型小鼠脾、胸腺指数增高,免疫活性增强,小鼠血清中SOD和ABTS活力升高,MDA含量降低。  结论:  本文对骆驼刺总茎枝多糖的提取方法、理化性质及抗氧化活性进行了研究。1.单因素及正交方法对骆驼刺茎枝多糖提取工艺进行筛选,经验证实验证明所筛选的方法较为稳定,多糖得率较高。2.骆驼刺茎枝的多糖含量为2.7%,比刺糖的糖含量少,是一种含有8种单糖的杂多糖,且为酸性多糖,而骆驼刺常用药用部位刺糖为中性多糖。3.骆驼刺茎枝多糖具有一定的体内外抗氧化活性,可通过调节免疫活性和抗氧化活性发挥抗衰老作用。本研究对扩大民族药骆驼刺药用部位提供理论基础与科学依据。
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