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在获得两性可育并形成群体的异源四倍体鲫鲤群体和大规模获得不育三倍体鱼的基础上,利用杂交等生物学方法对三倍体鱼进行遗传改良,并用细胞和分子生物学方法研究新型三倍体鱼的遗传、生殖等生物学特性,主要内容包括以下几点:
1.四倍体鲫鲤与二倍体红鲫交配形成了新型三倍体鲫鱼,该三倍体鲫鱼的体侧扁,近似纺锤形,体色为青灰色,无口须。他们的大部分可量比例性状和可数性状都介于父母本之间,并且一些可量比例性状超出亲本范围,体现出杂种特征。第一年养殖结果表明,把同规格三倍体鲫鱼和二倍体红鲫混养,三倍体鲫鱼生长速度比红鲫快11.11%。性腺观察结果表明三倍体鱼的性腺发育比普通二倍体鱼明显滞后,生殖细胞呈退化现象。与以前用四倍体鲫鲤和日本白鲫交配形成的三倍体湘云鲫相比,本文中的三倍体鲫鱼不但保持了生长速度快、不育的特点,而且表现出完全没有口须的鲫鱼类型的特征,这在细胞遗传和鱼类育种方面都具有重要的意义。
2.利用雌性四倍体鲫鲤与雄性红鲫交配得到了新型三倍体鱼的反交品种-四倍体鲫鲤(♀)×红鲫(♂)。这种反交鱼体型偏向于红鲫,与无须新型三倍体红鲫最明显的差异是它们拥有两对口须。在繁殖季节,四倍体鲫鲤(♀)×红鲫(♂)的卵巢和精巢指数明显低于作为对照的红鲫卵巢和精巢指数;组织学切片表明四倍体鲫鲤(♀)×红鲫(♂)的卵巢和精巢不能产生成熟的卵子和精子。
3.运用微卫星DNA-聚合酶链式反应-聚丙烯酰胺凝胶电泳基因分析技术,从Crooijmans et al分离的包含CA重复单元的普通鲤鱼的31对微卫星引物,筛选出6对引物用于新型三倍体鲫鱼和其反交品种的遗传分析。电泳结果表明,这六对引物均能在实验鱼中稳定的扩增出相应的同源序列,并且扩增的稳定性和重复性都很好。新型三倍体鲫鱼和其反交品种的平均观测杂合度、平均期望杂合度,以及有效基因数分别为0.4054、0.5889、2.0656和0.5042、0.6308、2.3223。两种鱼的平均遗传距离为0.0918。