芦笋茎枯病抗性的生理基础研究及抗性突变体的筛选

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芦笋(Asparagus officinalis L.)别名石刁柏,属百合科天门冬属,以嫩茎为食的雌雄异株多年生植物,是出口创汇的一种高档蔬菜。芦笋茎枯病是一种世界性分布的毁灭性病害,在中国、日本、美国、巴西、法国等20个国家发生危害,一般发病率50%~100%,病茎枯死率10%~30%,重者全田毁灭,每年造成巨大的经济损失。我国芦笋产区常常发生因本病的严重为害而造成基地成片翻耕改种或边种边毁的现象。本研究以芦笋品种美国加州UC308 F1为材料,利用苗期接种天门冬拟茎点霉,研究营养液加硅和喷施甲壳素处理对芦笋幼苗主要抗氧化系统及抗病相关代谢酶活性的影响,及对茎枯病抗性的诱导,旨在阐明硅与甲壳素在抵御、缓解芦笋茎枯病病害中的调节机制,为芦笋茎枯病的防治提供技术依据;另外本研究还比较了不同芦笋品种愈伤再生能力,研究了烷化剂甲基磺酸乙酯(EMS)处理对芦笋愈伤组织分化的影响,为芦笋抗病突变体的筛选提供研究基础。主要结果如下:1.芦笋茎枯病菌——天门冬拟茎点霉[Phomopsis aspasagi(Sacc)Bubak]在含不同浓度NaCl、Na2SiO3溶液的PDA培养基中培养,结果发现NaCl处理对病菌的生长没有抑制作用;而不同浓度的Na2SiO3均能明显抑制病菌的生长。虽然低浓度(3 mmol/L)的Na2SiO3对病菌生长的抑制作用与对照相比没有显著差异,但Na2SiO3浓度大于6 mmol/L时,对病菌生长的抑制作用显著地高于对照,且随Na2SiO3浓度升高对病菌的生长抑制越明显。2.接种天门冬拟茎点霉后,施2.0 mmol/L硅处理提高了芦笋体内过氧化氢酶(CAT)、愈创木酚过氧化物(G-POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氮酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶活性,极显著的降低了芦笋茎枯病发病率和发病指数,相对防治效果达39.33%,提高了芦笋对天门冬拟茎点霉的抗病能力。3.接种天门冬拟茎点霉后,在不同时期喷施甲壳素都能使芦笋体内过氧化氢酶(CAT)、愈创木酚过氧化物酶(G-POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)活性明显提高,但不同时期喷施对各种酶的活性影响不同,接种后马上喷施影响最显著;在接种前2 d、接种当天、接种后2 d喷施甲壳素都能显著降低了芦笋经枯病的发病率和发病指数,相对防治效果分别为39.33%、45.45%和23.68%,喷施甲壳素提高了芦笋对茎枯病的抵抗能力。4.在相同培养条件下芦笋不同品种的脱分化率及愈伤生长速度不同,品种‘硕丰’脱分化率最高。0.7%EMS对愈伤组织的致死率及褐化率显著高于0.5%EMS。相同浓度的EMS处理对不同材料的影响有显著差异,对品种‘冠军’影响极显著。培养的愈伤组织在含有激动素1 mg/ml KT的培养基上分化率最高,达61.8%;‘冠军’的分化率显著高于其它两个品种。该体系可用于芦笋抗性突变体的筛选。
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