金修饰磁性复合粒子的光化学制备及其作为生物分离载体的初步研究

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金修饰的磁性复合粒子(简称金磁颗粒)因具有纳米金的光学、电学和表面组装化学等性质,以及借助外磁场可以快速分离且操作简单的优势,使其成为一种理想的生物分离载体,近年来受到广泛重视。本文分别采用光化学法和沉淀法制备了两种胺基高分子磁粒,利用胺基对金胶体的稳定作用,采用光化学法在胺基高分子磁粒表面复合金胶体,并对制备的金磁颗粒作为生物分离载体的应用性能进行了初步评价。1.以烯丙基胺和聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯为单体,采用光化学聚合法制备了核-壳型聚乙二醇修饰的胺基高分子磁粒(Fe3O4/p(AAM-co-mPEGMA)),并借助FTIR、TGA、TEM、PCS、VSM等对其表征。结果表明,产物的平均粒径为70nm,具有较高的饱和磁化强度(30.2emu/g)以及良好的分散稳定性。适当提高烯丙基胺用量可以制备出胺基密度较高的高分子磁粒。2.以Fe3O4/p(AAM-co-mPEGMA)作为基底材料,在丙酮和异丙醇存在下借助紫外光辐照还原氯金酸制备了金磁颗粒(Fe3O4/p(AAM-co-mPEGMA)/Au)。利用UV-vis对反应进程的研究发现异丙醇和丙酮浓度的降低导致纳米金的形成速率减缓和纳米金生成的诱导期的增长;提高氯金酸浓度尽管可以得到尺寸更大和浓度更高的纳米金,但需要更长的反应时间;在低光照强度下还原氯金酸的速率较慢。这些结果可以从羟羰自由基(金前驱体的还原剂)的产生效率和金粒的成核-生长规律解释。进一步表征了金磁颗粒的结构、形貌和磁性质,证实金磁颗粒的尺寸约为200-300nm,其表面生长了尺寸约为20nm、具有面心立方结构的金粒,金磁颗粒的Ms为28.8emu/g,磁响应时间小于4分钟,基本具备了应用特征。3.采用原位沉淀法制备了聚乙烯亚胺修饰的四氧化三铁(Fe3O4/PEI),将其作为磁核采用光化学方法复合金,得到亚微米、不规则团状的金磁颗粒,所含金粒的尺寸介于13-23nm;金磁颗粒的饱和磁化强度高达36.9emu/g。4.以寡核苷酸ssDNA作为生物大分子模型,通过在上述两种金磁颗粒表面组装核酸捕获探针、利用捕获探针-金磁颗粒借助核酸杂交实现分离和检出核酸靶分子,初步评价其作为磁载体分离和检出靶分子的效能。发现Fe3O4/p(AAM-co-mPEGMA)/Au组装的DNA探针较多,为131pmol/mg载体,并可用于浓度为50nM靶分子的分离和检出,分离过程不受蛋白、任意序列核苷酸的干扰,表现出较好的特异性。
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