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目的:过氧化物酶体增殖物活化受体γ(Peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ),是核激素受体家族成员之一,参与炎症、脂质代谢等生命进程,并对骨代谢发挥一定影响。牙骨质与骨组织结构类似,由成牙骨质细胞分泌附着于牙根表面,对维持牙周稳定与牙周组织再生发挥重要作用,牙骨质丢失导致牙根吸收与牙齿脱落。PPARγ对成骨细胞分化、矿化影响被大量研究,但其对成牙骨质细胞矿化分化影响研究较少。因此本实验旨于探究PPARγ对成牙骨质细胞的矿化分化影响及其机制。方法:1.用不同浓度PPARγ激动剂罗格列酮,抑制剂GW9662刺激细胞,在RNA与蛋白质水平检测成牙骨质细胞中PPARγ的表达,结合细胞活力影响选取最合适药物浓度作为后续实验浓度;2.成牙骨质细胞在PPARγ激动剂/抑制剂作用下,分别矿化诱导3、7、10天,进行碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色,茜素红染色,实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real time PCR,qRT-PCR)与蛋白免疫印记实验(Western blot)检测矿化标记基因ALP、转录因子2(Runt related transcription factor 2,RUNX2)与骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)表达情况;3.PPARγ激动剂/抑制剂作用下总蛋白与胞浆/胞核蛋白中β-catenin表达情况;经典Wnt/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(Lithium chloride,Licl)刺激成牙骨质细胞,探究β-catenin细胞内转位情况及对细胞矿化影响。矿化诱导3、7和10天后分别提取细胞RNA与蛋白质,检测矿化相关标志物ALP、RUNX2与OCN的表达。并用Licl干扰PPARγ激动剂,探究矿化指标表达情况;4.qRT-PCR技术检测在炎症因子肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,成牙骨质细胞中炎症因子白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和矿化相关因子ALP、RUNX2与OCN的表达情况。结果:1.成牙骨质细胞可表达PPARγ,且在罗格列酮作用下表达升高,GW9662作用下表达降低;2.矿化诱导结果显示,激动剂促进矿化标记基因ALP、RUNX2与OCN表达,ALP染色加深,矿化结节形成增多,抑制剂产生相反结果;3.PPARγ激动剂罗格列酮抑制β-catenin在胞浆/胞核蛋白以及总蛋白中表达,拮抗剂GW9662促进该蛋白的表达。Licl促进β-catenin向胞核中转位,抑制矿化基因在成牙骨质细胞中表达,并可反转由PPARγ激动剂带来的促矿化分化效果;4.qRTPCR结果显示,TNF-α促进炎症因子表达,矿化因子表达降低。罗格列酮预刺激后,炎症因子表达降低,且在炎症因子干扰下罗格列酮促进成牙骨质细胞的矿化分化,该效应具有浓度依赖性。结论:本研究结果提示,经典Wnt/β-catenin信号通路对成牙骨质细胞系OCCM-30细胞的矿化分化可能发挥负性反馈作用。PPARγ可通过抑制经典Wnt/β-catenin信号通路促进成牙骨质细胞的矿化与分化。该研究对牙周炎的治疗与牙周组织再生具有一定的临床指导意义。