藏药甘青乌头中二萜生物碱的研究

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甘青乌头是藏医常用药,藏药名榜嘎(),植物来源系毛茛科乌头属植物甘青乌头Aconitum tanguticum(Maxim.)Stapf的干燥全草(“榜嘎”的另一基源为毛茛科乌头属植物船盔乌头Aconitum naviculare(Bruhl.)Stapf的干燥全草)。始载于《月王药诊》,其性凉、味苦、有小毒,具清热解毒功效,多入藏成方制剂用于传染病发热,流行性感冒,肝、胆热病,肺热,肠热和食物中毒等疾病的治疗。甘青乌头的化学成分包括生物碱(以二萜生物碱为主)、黄酮苷、酚酸和挥发油等,具有抗病毒、抗菌、抗炎镇痛、抗肿瘤和抗心律失常等药理活性。本文采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱、制备液相色谱、制备硅胶薄层色谱和重结晶等分离纯化手段对甘青乌头总生物碱部位的化学成分进行了系统研究,从中共分离得到了43个化合物。根据理化性质、光谱分析(UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC和1H,1H-COSY等),X射线单晶衍射及与文献值对比的方法,鉴定了其中30个化合物的结构,其中新化合物4个,首次从甘青乌头中分离得到的化合物24个,其中21个生物碱(二萜生物碱9个):分别为2β,9β,11β,13β-tetrahydrohetisine,hetisane-2α,11α,13α,19β-tetrol-2-benzoate-11-sulfonate,13-dehydro-2β,3α,6β-trihydroxyhetisine,芥子酰胺-4-O-β-D-葡萄糖苷,11α,13α-dihydroxyhetisinone,异叶乌头碱,tanaconitine,盐酸阿替新,苯甲酰胺,海替生,氧化大麦碱,candicinechloride,二氢阿替生,异光黄素,对羟基苯乙胺,3-(4-aminophenyl)propenoic acid,腺苷,3-(p-hydroxyphenyl)propionic acid amide,N-甲基酪胺,环异亮氨酸-亮氨酸二肽,苯丙氨酸;5个酚酸:分别为对羟基苯乙醇,对羟基桂皮酸,尼泊金丁酯,红景天苷,trans-ferulic acid-4-O-β-D-allopyranoside;4个其他类型化合物:分别为β-谷甾醇,邻苯二甲酸正丁基异丁基酯,苯甲酸,(2R,3R)-2,3,4-三羟基丁酸。采用CPE法对已经分离鉴定的7个二萜生物碱成分(分别为11α,13α-dihydroxyhetisinone,异叶乌头碱,tanaconitine,盐酸阿替新,海替生,2β,9β,11α,13β-tetrahydrohetisine,13-dehydro-2β,3α,6β-trihydroxyhetisine)进行了抗H1N1流感病毒活性筛选,结果表明化合物11α,13α-dihydroxyhetisinone具有良好的抗H1N1流感病毒活性。说明二萜生物碱可能为甘青乌头药材清热解毒的化学成分。为了有效监管市场上的榜嘎药材,本文建立了相应的质量标准。2015版《中国药典》规定榜嘎的基源为甘青乌头Aconitum tanguticum(Maxim.)Stapf或船盔乌头Aconitum naviculare(Bruhl.)Stapf的干燥全草。参照2015年版《中国药典》四部通则相关方法,对榜嘎的水分、总灰分及醇溶性浸出物进行了测定;以盐酸阿替新为检测指标,采用紫外分光光度法建立了榜嘎中总生物碱的含量测定方法。以槲皮素和山柰酚为检测指标,采用高效液相色谱法建立了榜嘎药材中总黄酮醇苷的含量测定方法。测定结果显示,17批榜嘎药材水分含量介于7.23%~10.2%之间,平均值8.31%;总灰分含量介于5.94%~18.6%之间,平均值10.7%;醇溶性浸出物含量介于11.3%~29.4%之间,平均值为21.4%;生物碱含量介于0.386%~1.99%之间,平均值0.896%;总黄酮醇苷含量介于0.420%~3.09%之间,平均值为1.63%。依据2015年版《中国药典》限量标准制定原则,本文暂定榜嘎药材中水分含量不得过12.0%,总灰分不得过15.0%,醇溶性浸出物质量分数不得低于17.0%,总生物碱含量不少于0.4%,总黄酮醇苷含量不得少于0.8%。建立的标准具有良好的专属性和准确性,可用于榜嘎药材的质量控制。本文还对乌头属藏药的种属与分布、分类、化学成分和药理活性等方面的研究进展进行了综述,旨在为乌头属藏药的深入研究与开发提供参考。
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