乌苏里瓦韦抗炎活性成分的分离鉴定及药理作用研究

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目的:对乌苏里瓦韦中的抗炎活性成分进行分析鉴定,对其药理作用进行研究,为乌苏里瓦韦的开发和利用提供依据。  方法:乌苏里瓦韦提取液采用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇有机溶剂进行梯度萃取,用理化鉴定、薄层色谱分析法对各梯度萃取物的化学成分进行鉴定,采用HPLC法对乌苏里瓦韦各梯度萃取物中的绿原酸和蜕皮甾酮的含量进行测定;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀的模型评估乌苏里瓦韦各梯度萃取部位的抗炎作用,采用醋酸致小鼠腹部疼痛扭体法对乌苏里瓦韦镇痛作用进行研究;采用清除 DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力实验研究乌苏里瓦韦的抗氧化能力,体外抑菌实验的方法测定乌苏里瓦韦对粪球菌、沙门氏杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌五种菌种的抑菌能力,并用正交实验法确定最佳抑菌效果的条件;采用大孔吸附树脂纯化乌苏里瓦韦中的绿原酸并测定纯化后粗品中绿原酸的含量。  结果:乌苏里瓦韦三氯甲烷萃取部分含有多糖和皂苷类物质;乙酸乙酯萃取部分含有鞣质、皂苷、黄酮类物质,绿原酸含量为0.1226%;正丁醇萃取部分含有蒽醌、鞣质、多糖、皂苷、强心苷、黄酮类物质,可能含有3,5-二羟基黄酮类物质,绿原酸含量为0.8708%,蜕皮甾酮含量为0.1417%;原液萃取物中含有蒽醌类、多糖类、黄酮类、鞣质类、皂苷类物质、绿原酸成分,绿原酸含量为0.0824%。乌苏里瓦韦各梯度萃取液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀均有抑制作用,其中正丁醇萃取液抑制作用最为显著(P<0.01)。乌苏里瓦韦提取液的高剂量和中剂量组可以明显减轻小鼠疼痛,与空白对照组比较,中剂量具有镇痛最显著;与阳性对照组比较,高剂量组镇痛效果,无明显差异(P>0.05)。乌苏里瓦韦提取液对超氧阴离子自由基清除效果较维生素C稍强;乌苏里瓦韦提取液对枯草杆菌的抑菌效果最好,其中当蔗糖浓度为20%,Na+浓度为30%,乌苏里瓦韦石油醚萃取液为抑菌效果最佳提取工艺,最终得抑菌直径为8.932mm;大孔吸附树脂 HPD600纯化乌苏里瓦韦提取液中的绿原酸,纯化的绿原酸粗品含量为12.47%。  结论:乌苏里瓦韦具有较好的抗炎作用,正丁醇萃取部位抗炎效果最佳,绿原酸含量最高,为0.8708%,蜕皮甾酮的含量为0.1417%。乌苏里瓦韦提取液具有很好的抗氧化和抑菌作用。纯化的粗品中绿原酸含量为12.47%。
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