人工关节置换(Artificial joint replacement,AJR)术后感染是人工关节置换术后最严重的并发症之一,是广大关节外科医生不可回避的问题,其诊断的关键是找到致病菌,一旦明确病原菌,便可确定诊断,就可以开始相应的治疗。目前临床上主要用于检测病原菌的方法是细菌分离培养,检测耗时长,众多因素容易造成假阴性结果的缺点易导致延误最佳治疗时机。恒温扩增微控流芯片核酸分析技术是分子生物学技术迅猛发展背景下应运而生的新型病原菌检测技术,具有检测快速、灵敏度高、准确性高、简便高效等优点。摈弃了传统聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术操作繁琐、温度要求严格、标本易污染的缺点。从标本处理开始到检出结果,全程只需要2小时。可以同时检测多种病原菌。恒温扩增微控流芯片核酸分析技术目前主要被应用于呼吸道病原菌的检测,在全国5所大型三甲医院进行的2518例标本检测中,准确率高达94.5%。由于此项技术是近两年的新兴技术,目前尚未应用于AJR术后感染病原菌的检测,国内外也无相关文献报道。本课题通过研究恒温扩增微控流芯片核酸分析技术在AJR术后感染病原菌检测中的效果,探讨此项技术的临床实用性及推广价值。毋庸置疑,随着科学技术的发展以及临床与科研的紧密结合,恒温扩增技术在病原菌的诊断中必定占有一席之地。[目的]通过分析恒温扩增微控流芯片核酸分析技术(Nucleic Acid Analysy Technique of Isothermal Amplification Microfluidic Chip,NAATIAMC)快速检测AJR术后感染病原菌的效果,探讨其临床实用性及推广价值。[方法]1.选取2016年1月至2017年2月昆明医科大学第一附属医院骨科及呈贡分院骨科收治的疑似人工关节置换术后感染的28例患者为研究对象,其中男性12例,女性16例,年龄64.5±13.1岁(37～83岁);人工膝关节置换术后8例,人工髋关节置换术后20例。2.将采集到的破溃创口分泌物或关节穿刺液、术中假体周围组织碾磨液标本分为两组,各取5ml。同时采用恒温扩增微控流芯片核酸分析技术(实验组)和细菌分离培养法(对照组)进行病原菌检测/培养。3.记录实验组和对照组检测/培养出病原菌的种类及耗时,列出病原菌检测/培养结果四格表。通过一致性的假设检验比较两组数据结果的一致性;采用χ2检验,比较两组阳性率,p<0.05,表示差异有统计学意义。[结果]1.实验组检测结果:24例阳性,4例阴性;对照组培养结果:17例阳性,11例阴性。实验组检测结果为阳性的24例标本中有7例行细菌分离培养结果为阴性;实验组中检测结果为阴性的4例标本,行细菌分离培养同样为阴性。2.实验组耗时约2h,对照组耗时约4-7d。3.实验组检测出的病原菌以金黄色葡萄球菌最多见(11株,39.3%),其次是大肠埃希菌(5株,18%)、耐甲氧西林葡萄球菌(3株,10.7%)、结核杆菌(3株,10.7%),肺炎克雷伯菌(2株,7.1%)、铜绿假单胞菌(2株,7.1%),鲍曼不动杆菌(2株,7.1%)。对照组培养出的病原菌以金黄色葡萄球菌最多见(8株,40%),其次是大肠埃希菌(5株,25%)、耐甲氧西林葡萄球菌(3株,15%)、肺炎克雷伯菌(2株,10%)、铜绿假单胞菌(1株,5%),鲍曼不动杆菌(1株,5%)。4.实验组恒温扩增微控流芯片核酸分析技术检测阳性率为85.7%(24/28),高于对照组细菌培养阳性率60.7%(17/28),差异有统计学意义(χ2=4.462,p<0.05)。Kappa 值为 0.66,一致性较好。[结论]1.恒温扩增微控流芯片核酸分析技术检测人工关节置换术后感染病原菌与细菌分离培养相比有较高的阳性检出率,可有效的避免传统细菌分离培养结果的假阴性。并且在耗时和效率方面较传统的细菌分离培养相比具有明显的优势。2.资料中,人工关节置换术后假体周围感染病原菌以金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌为主,其次是革兰氏阴性菌。3.本课题研究中,恒温扩增微控流芯片核酸分析技术对于结核杆菌的检测较细菌分离培养相比有一定的优势,显示了良好的应用前景。综上所述,恒温扩增微控流芯片核酸分析技术可适用于人工关节置换术后假体周围感染病原菌的检测,并具有便捷、快速及高阳性检出率,可早期诊断病原菌、指导有效治疗,从而缩短了抗感染治疗的时间,增进了患者的快速康复,因此,具有较高的临床推广价值。