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目的检钡(?)microRNA-182(miR-182)在结直肠癌与相应癌旁组织中的表达,并评估其在结直肠癌发生发展和预后中的价值。此外,进一步检测miR-182在转移性结直肠癌中的表达并与非转移癌中的表达相比较,并用体外实验探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响,进而评估miR-182在结直肠癌转移中的作用。方法1.应用实时荧光定量PCR技术检测173对结直肠癌(包括148例非转移癌,25例转移癌)与对应癌旁组织miR-182的表达情况。2.用Mann-WhitneyU检验或Kruskal-Wallis检验来评估niR-182表达情况与结直肠癌病人临床病理参数之间的关系。3.以Kaplan-Meier法描述miR-182及其它参数的生存曲线,并用对数秩检验(log-rank test)比较各生存曲线之间的差异。4.用COX相对危险回归法分析miR-182及其它参数在结直肠癌中的预后价值。5.体外用脂质体2000(lipofectamineTM2000)将miR-182模拟物及阴性对照瞬时转染结直肠癌HT-29细胞,并用实时荧光定量PCR检测各组转染效率。6.用t(?)answell小室实验观察各实验组细胞迁移数,来研究miR-182对结直肠癌细胞HT-29迁移能力的影响。结果1.结直肠癌组织中miR-182的表达水平显著高于对应癌旁组织(p<0.001),转移性癌组织miR-182的表达显著高于非转移癌(p=0.0166)。结果显示miR-182在不同组织中的表达差异较大,在148对非转移结直肠癌组织中的相对表达量是0.147(0.075-0.277){中位数(四分位数)},其对应癌旁组织中的相对表达量是0.051(0.019-0.117){中位数(四分位数)}；另外：miR-182在25对转移性结直肠癌组织中的相对表达量是0.254(0.134-0.538){中位数(四分位数)},其对应癌旁组织中的相对表达量是0.045(0.014-0.131){中位数(四分位数)}。2.结直肠癌组织miR-182表达水平与患者临床病理参数的关系结直肠癌患者组织miR-182表达水平与患者的肿瘤大小(p=0.016),局部淋巴结转移(p=0.008)和临床分期(p=0.020)密切相关,而与患者的年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤浸润程度和分化程度无关(p>0.05)。3.结直肠癌组织niR-182表达水平与患者生存时间相关随访的148例结直肠癌患者中,五年总体生存率为56.8%,根据miR-182在结直肠癌组织中表达的中位数分成高表达组和低表达组,其中niR-182高表达组的五年生存率为43.2%,miR-182低表达组的五年生存率为70.3%,可见miR-182高表达组的生存率显著低于低表达组(p=0.001)。通过Kaplan-Meier生存曲线分析显示结直肠癌患者的生存时间还与肿瘤浸润程度(p=0.022),局部淋巴结转移(p<0.001)和临床分期(p<0.001)密切相关,而与患者的年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无关(p>0.05)。4.COX相对危险回归法结果显示miR-182表达水平是结直肠癌患者独立的预后因素COX相对危险回归法单因素分析显示,结直肠癌组织中miR-182表达水平(HR=2.313；95%CI,1.379-3.879；p=0.001),肿瘤浸润程度(HR=2.214；95%CI,1.094-4.483；p=0.027),局部淋巴结转移(HR=3.523；95%CI,2.105-5.899；p<0.001)和临床分期(HR=2.975；95%CI1.943-4.555；p<0.001)都与结直肠癌患者预后相关；COX相对危险回归法多因素分析显示,miR-182表达水平(HR=1.790；95%CI,1.057-3.032；p=0.030)和局部淋巴结转移(HR=2.899；95%CI,1.704-4.933；p<0.001)是结直肠癌患者的独立预后因素。5. Transwell小室实验表明miR-182能够促进结直肠癌细胞HT-29的迁移能力HT-29细胞转染miR-182模拟物24小时后,其表达水平较对照组显著升高(p<0.05)。MiR-182过表达的HT-29细胞迁移数(61±9)显著高于阴性对照组(29±5)(p<0.05)和空白对照组(27±4)(p<0.05)。结论1. MiR-182在结直肠癌中高表达,并且与患者的肿瘤大小,局部淋巴结转移和临床分期密切相关,提示其在结直肠癌的发生发展中发挥着重要作用。2. MiR-182高表达组的生存率显著低于低表达组,并且COX相对危险回归法结果显示miR-182水平是结直肠癌患者独立的预后因素,提示其可作为结直肠癌患者的一个独立的预后分子和潜在治疗靶点。3. MiR-182在转移性结直肠癌中高表达,且高于非转移结直肠癌,此外其在体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力,提示niR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点。