【摘 要】
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目的:探究脂肪因子CTRP3与2型糖尿病患者冠状动脉钙化的相关性,进一步阐明CTRP3对高糖高脂诱导下血管平滑肌细胞成骨样分化的作用机制,旨在为冠状动脉钙化的早期发现以及临床治疗提供新的思路。方法:1.CTRP3与冠状动脉钙化的相关性研究研究对象入选河北医科大学第二医院心内科自2019年1月至2021年1月期间住院治疗的119名冠心病患者。根据是否存在2型糖尿病及有无冠状动脉钙化将119名患者分为
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目的:探究脂肪因子CTRP3与2型糖尿病患者冠状动脉钙化的相关性,进一步阐明CTRP3对高糖高脂诱导下血管平滑肌细胞成骨样分化的作用机制,旨在为冠状动脉钙化的早期发现以及临床治疗提供新的思路。方法:1.CTRP3与冠状动脉钙化的相关性研究研究对象入选河北医科大学第二医院心内科自2019年1月至2021年1月期间住院治疗的119名冠心病患者。根据是否存在2型糖尿病及有无冠状动脉钙化将119名患者分为3组:对照组（无冠脉钙化无糖尿病组）、冠脉钙化无糖尿病组、冠脉钙化合并糖尿病组。收集所有研究对象的一般临床资料（年龄、性别、身高、体重、血压、心率、左室射血分数）。实验室检查资料[糖化血红蛋白、空腹血糖、B型钠尿肽（BNP）、心肌酶（MYO、CK、CKMB、LDH、HBDH）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、尿酸]。应用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行血清CTRP3水平测定。2.CTRP3抑制平滑肌细胞成骨样分化的作用机制采用大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMCs）,随机分组:对照组（Vehicle）、高糖高脂（HGHL）组、CTRP3组、JW74（β-catenin抑制剂）组、CTRP3+WT-β-catenin（过表达β-catenin）组、CTRP3+JW74+WT-β-catenin组。应用钙离子浓度试剂盒对VSMCs进行钙离子浓度测定。应用Western blot对不同处理组细胞的成骨相关蛋白骨钙蛋白（OC）、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、I型胶原蛋白（COL-I）的表达水平进行测定。应用激光共聚集显微镜观察VSMCs核转位情况。3.统计分析数据统计采用SPSS 22.0统计软件,符合正态分布的计量资料表示为均数±标准差,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。偏态分布的计量资料用中位数±四分位数间距表示,组间比较采用秩和检验。卡方检验评估分类变量的分布差异。应用logistic回归分析计算不同变量对冠状动脉钙化的影响。构建ROC曲线,ROC曲线下面积（AUC）作为评估所标记的诊断性能的精度指标。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.CTRP3与冠状动脉钙化相关性研究1.1单因素方差分析及卡方检验表明:冠脉钙化合并糖尿病组、冠脉钙化无糖尿病组、无冠脉钙化无糖尿病组的性别、年龄、糖化血红蛋白、空腹血糖、CKMB、TC、TG、HDL-C、CTRP3具有统计学差异。并且冠脉钙化合并糖尿病组的CTRP3水平显著低于其他两组。1.2对数据进行Logistic回归分析,结果发现:CTRP3为冠状动脉钙化的保护性因素。绘制ROC曲线:血清CTRP3水平判断冠状动脉钙化的RO-C曲线下面积为0.717,界值为36.25ng/m L时,预测冠状动脉钙化的敏感性为54.6%,特异性为87.0%（95%CI:0.586-0.826;P=0.002）。2.CTRP3抑制VSMCs成骨样分化的作用机制2.1 HGHL能促进VSMCs成骨样分化并且具有时间依赖性。2.2 HGHL刺激可使VSMCs中钙离子浓度增加,并可促进β-catenin发生核转位。2.3 CTRP3预处理细胞可明显减低HGHL刺激的VSMCs内钙离子浓度的升高并抑制成骨相关蛋白OC、BMP-2、COL-I的表达。2.4 CTRP3可明显抑制HGHL刺激的VSMCsβ-catenin的核转位。过表达β-catenin后,可明显减弱CTRP3对VSMCs成骨样分化的抑制作用。结论:1.CTRP3在冠状动脉钙化患者中水平降低,CTRP3对冠状动脉钙化具有预测价值。2.CTRP3能够抑制高糖高脂诱导下β-catenin的核转位进而抑制平滑肌细胞成骨样分化。
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