目的: 帕金森病(Parkinsons disease, PD)的主要病理改变为中脑黑质致密部（pars compacta of substantia nigra, SNc）的多巴胺(dopamine, DA)能神经细胞进行性变性死亡。研究发现，PD 患者中脑黑质致密部残存的抗变性能力很强的DA 能神经细胞中都含有钙结合蛋白-D28K（Calbindin-D28K, CB），而且最近研究证实CB 不仅可以通过缓冲细胞内游离的Ca2+，还可以通过调控Ca2+介导的死亡信号通路来保护神经细胞。因此，我们通过慢病毒介导，使CB 在DA 能神经细胞中过表达，观察CB 对细胞抗凋亡能力的影响，为PD 的基因治疗提供新的方法和手段。　　 方法: 根据pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP 病毒载体多克隆位点上的酶切位点（BamHⅠ, NotⅠ），用RT-PCR 方法扩增CB 基因片段，定向克隆至病毒载体。酶切及测序鉴定阳性克隆pCDH-CB。脂质体法将质粒转染入MN9D 细胞，Westernblot 检测细胞内CB 表达量。6-OHDA 损伤转染后的MN9D 细胞，流式细胞仪检测凋亡率，并且使用Western blot 检测凋亡因子的表达。接着将含有CB 基因片段的病毒载体和包装质粒共转染293T 细胞，收集、纯化上清，用梯度稀释法和定量PCR 法检测病毒（Lenti-CB）的滴度。将慢病毒立体定位注射入MPP+的PD 模型小鼠的黑质致密部。检测小鼠行为学变化，Western blot 和免疫组化检测小鼠左右侧黑质CB、酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH)和抗凋亡因子（Bcl-2）的表达。　　 结果: 经测序鉴定，pCDH-CB 序列完全正确。转染后MN9D 细胞中的CB 表达水平增高。6-OHDA 损伤后凋亡率降低和Bcl-2表达量增高。经293T 细胞包装后收获了病毒储存液，病毒Lenti-CB 和对照病毒Lenti 滴度均为2×108TU/ml。PD 模型小鼠右侧黒质致密部注射病毒后，小鼠的行为学（爬格子、站立、游泳、悬挂）较对照组有所改善(P < 0.05)；Western blot 检测右侧中脑黑质TH 和CB 的表达量较对照组增高(P < 0.05)，黑质Bcl-2表达水平也明显升高(P < 0.05)；免疫组化结果显示，黑质TH+和CB+神经细胞数较对照组增多(P < 0.05)。　　 结论: 成功构建携带CB 慢病毒表达载体，并成功包装成具有感染能力的病毒颗粒。过表达CB 增加DA 能神经细胞抗损伤的能力，其机制可能为CB 通过调节Bcl-2的表达来实现。