海鞘(Ascidian)是尾索动物亚门(Uronordata)海鞘纲的尾索动物。在自然界中已知有1500余种,主要分布在热带及亚热带海域。我国南海有丰富的海鞘资源,近年来对海鞘的化学成分及其生理活性的研究是海洋天然产物研究的热门领域,研究已发现海鞘类生物中含有生物碱类、肽类、吲哚类、重金属螯合剂、多硫化物、大环内酯、萜类等数十种化合物,且大部分都具有较强的生理活性,如抗肿瘤、抗病毒、抗菌、诱导肌浆网释钙、抑制钙调蛋白活性等,其中有关抗肿瘤及抗病毒的研究报道较多。 目前对海鞘的开发研究主要集中于抗肿瘤或抗病毒新化合物的分离筛选、合成及其结构改造。但对于海鞘抗乙型肝炎病毒的研究尚未见报道。本课题利用转染乙肝病毒(Hepatitis B Virus, HBV)的2.2.15细胞作为体外药效学模型,对新鲜皱瘤海鞘[Styela plicata (lesueur)]的醇提物进行体外抗乙肝病毒试验,以体外抗乙肝病毒药效学结果为依据,对我国南海的优势海鞘品种皱瘤海鞘的抗乙肝病毒活性成分进行药效学跟踪研究,以获取具有抗乙肝病毒活性的单体成分,并对提取得到的皱瘤海鞘抗乙肝有效部位建立了HPLC指纹图谱。本课题可分为三个部分。 1 皱瘤海鞘抗乙肝病毒活性成分的分离与鉴定 取新鲜皱瘤海鞘,在室温下以95%乙醇浸泡后得提取物,取提取物用水溶解,依次用相同体积的二氯甲烷、正丁醇萃取,将水部分分别上大孔吸附树脂