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研究背景：当今社会,癌症已成为威胁人类健康的一大杀手,而乳腺癌又是女性当中排名第一的常见恶性肿瘤。在全球许多发达国家及发展中国家,乳腺癌的发病率每年都在上升,并日趋年轻化,严重威胁了女性健康。据美国CA杂志报道,2011年美国患乳腺癌的女性已达20多万人,占女性恶性肿瘤的30%。而我国也已成为乳腺癌高发的国家之一,每年约有5万名女性患乳腺癌。如何治疗乳腺癌并提高患者的生存率、降低患者的复发率和病死率已成为众多科研人员研究的焦点。早在1995年,Kerekatte等就已研究发现在乳腺癌组织标本中广泛存在eIF4E表达量上调的现象。此后的研究也表明,由eIF4E参与装配的eIF4F翻译起始复合物活性的上调与多种人类恶性肿瘤相关。eIF4F翻译起始复合物具有启动5’帽式结构eIF4E翻译的功能,通过调控多种细胞因子的表达促进肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力和肿瘤组织的血管化,抑制肿瘤细胞的凋亡,并提高肿瘤细胞对放化疗的抵抗能力,加速肿瘤生长和演进。而eIF4E作为识别并结合rnRNA5’帽式结构的主要因子,对eIF4F翻译起始复合物行使其功能有着举足轻重的作用。有研究表明,4EBP家族成员可竞争性的抑制eIF4E与eIF4G的结合,阻断eIF4F复合物的装配。但上调4EBP家族成员的磷酸化水平,则会使之丧失与eIF4E结合的能力,从而解除4EBP对eIF4E的封闭能力并促进eIF4F复合物装配。4EBP家族成员的磷酸化修饰依赖于mTOR对其RAIP基序和TOS基序的识别,因此我们推测使用同时删除RAIP基序和TOS基序的4EBP2突变体4EBP2D能够更高效的诱导肿瘤消退。研究目的：采用同时删除RAIP基序和TOS基序的4EBP2突变体构建真核表达载体,并进行细胞实验和动物实验,探讨截短型4EBP2基因对小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖、迁移抑制作用及促凋亡作用,以及对小鼠肿瘤模型的治疗作用。初步探讨其诱导肿瘤消退的分子机理。研究方法：构建pSecX-4EBP2真核表达载体并转染至大肠杆菌中克隆扩增,采用二氧化硅吸附法大提质粒并用Triton X-114等温法去除内毒素,Lipofectamine2000转染质粒至细胞,通过WST-8法、Wound healing法以及流式细胞仪测定pSecX-4EBP2真核表达载体对4T1细胞的增殖、迁移、周期及凋亡的影响,并用Western blot检测其相关信号通路分子表达量变化情况。最后将pSecX-4EBP2真核表达载体通过PEI介导转染至小鼠乳腺癌模型,探讨其对小鼠乳腺癌的治疗作用。研究结果：细胞实验结果显示,截短型4EBP2对于4T1细胞的增殖和迁移具有一定的遏制作用,并能促进4T1细胞的凋亡。免疫印记杂交结果显示,截短型4EBP2能够降低MDM2以及HIF-1α的表达水平,并诱发P53的表达量上升。动物实验表明,截短型4EBP2对荷4T1乳腺癌小鼠具有一定的治疗作用,基因治疗12天后,肿瘤体积与治疗前相比消退了19.22%,而对照组小鼠肿瘤体积则增长至治疗前体积的4倍。