Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响及机制的初步探讨

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目的:  观察Trop2过表达对人胃黏膜上皮细胞GES-1迁移能力的影响,并对其作用机制进行初步探讨。  方法:  Real-time PCR和Western-blot检测GES-1、BGC-823、MGC-803Trop2的mRNA和蛋白的表达水平;构建过表达Trop2质粒及空载对照质粒并转染GES-1细胞,检测转染效率;细胞划痕实验和transwell迁移实验检测过表达Trop2后GES-1细胞迁移能力的变化情况;Western-blot检测过表达Trop2后GES-1细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)表面标志(上皮细胞标志E-cadherin,间皮细胞标志fibronectin,vimentin)的变化情况。  结果:  相比胃癌细胞株BGC823和MGC803,Trop2在GES-1细胞中的mRNA和蛋白表达水平均较低;过表达Trop2的质粒转染GES-1后,Trop2的mRNA表达水平与未转染组相比提高6.18±0.52倍,而空载对照组和未转染组相比无明显变化,蛋白水平的变化情况和mRNA相同;细胞划痕实验表明,转染72h后,过表达组细胞迁移率达到95%,空载对照组的细胞迁移率为50%,两组相比有统计学意义(P<0.05);transwell迁移实验发现,转染24h后,过表达组穿出细胞个数为87±6个,而空载对照组为41±6个细胞,两组相比有统计学意义(P<0.05);Western-blot检测过表达Trop2后,随着Trop2蛋白的表达量增高,GES-1细胞E-cadherin表达下调,fibronectin和vimentin表达上调。  结论:  Trop2过表达可以提高胃黏膜上皮细胞的迁移能力,其机制与Trop2促进胃黏膜上皮的EMT有关。
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