纳米粒子组装电化学发光免疫分析研究

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电化学发光(ECL)作为一种高灵敏度和高选择性的分析方法已经引起人们极大的研究兴趣。ECL分析方法是对电极施加一定的电压进行电化学反应,反应产物之间或反应产物与体系中某组分进行化学反应,产生激发态物质,激发态物质回到基态时产生发光,用光电倍增管等测量发光强度,从而对物质进行痕量分析的一种方法。电化学发光分析法以其无放射性、方法简便、灵敏度高、选择性好、可控性强等优点受到人们的广泛关注。近年来,将特异性生物分析和性能优良的纳米粒子引入分析化学的研究领域,为建立灵敏、快速的分析方法提供了巨大潜力和发展空间。 本论文研究工作旨在研究纳米粒子对电化学发光信号的增强作用,结合分子识别物质抗原/抗体的特异性,建立灵敏、快速、具有实用价值的纳米粒子电化学发光分析方法和电化学发光免疫分析方法。 本论文是由引言和研究报告两部分组成。 第一部分 引言 详细介绍了电化学发光分析的原理、特点和纳米粒子在电化学发光分析中应用,并对近几年来纳米粒子在电化学发光分析中的研究进展进行了评述。 第二部分 研究报告部分 研究了金纳米粒子修饰石墨电极上中性介质中N-(4-氨基丁基-)-N-乙基-异鲁米诺(ABEI)的电化学发光行为,克服石墨电极上的重现性差和污染问题,建立了高灵敏检测ABEI的电化学发光分析方法;以ABEI为电化学发光标记物,建立了金纳米粒子修饰石墨电极上测定人免疫球蛋白(hIgG)的均相电化学发光免疫分析方法,克服非均相免疫分析分离步骤繁琐的问题,灵敏、快速的实现hIgG的测定:合成了鲁米诺、地高辛掺杂的二氧化硅纳米粒子,建立了纳米粒子多标记小分子均相电化学发光免疫分析方法,克服了小分子半抗原难以标记的困难和提高了免疫分析的灵敏度,灵敏、快速的实现了地高辛及其抗体的测定。 本文具体研究内容如下: 1.ABEI在金纳米粒子修饰电极上的电化学发光行为及其测定的研究 在金纳米粒子修饰电极上,研究了ABEI-H2O2的电化学发光行为。0.10mol/L磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH7.4)中,在0~1020V(vs.Ag/AgCl)范围内,ABEl在+0.45~+0.90
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