三种抗生素对淡水池塘底泥硝化作用及氨氧化微生物生长和群落结构的影响

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氨氮污染是我国池塘养殖业面临的最严峻的环境问题之一。氨氧化细菌(AOB)在氨氮转化中发挥着至关重要的作用。近年来发现氨氧化古菌(AOA)在许多环境中的数量和活性远大于氨氧化细菌,可能在氮循环中发挥了更大的作用。在池塘养殖业中,抗生素是使用量非常大的常用渔药之一。因其不易降解的特性,抗生素对环境造成的危害日益突出。研究抗生素对氮循环的负面影响,对规范使用抗生素类药物具有重要价值。本研究选取氯霉素(氯霉素类)、磺胺嘧啶(磺胺类)、恩诺沙星(喹诺酮类)作为三类抗生素的代表,通过实时荧光定量、变性梯度凝胶电泳等分子生物学手段研究它们对淡水池塘沉积物中氨氧化细菌和氨氧化古菌数量和群落结构的影响,并检测沉积物中氨氮、亚硝态氮和硝态氮浓度的变化以表征硝化水平发生的变化,以期揭示三种抗生素对氮循环的影响。主要研究结果如下:(1)各浓度组(50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg,500mg/kg)氯霉素均抑制了硝化作用的进行,且随着氯霉素浓度的升高,抑制作用增强:50mg/kg氯霉素对氨氧化作用的抑制效应不明显,但显著降低了整体硝化水平;100-500mg/kg的氯霉素同时显著降低了氨氧化水平和硝化水平,100mg/kg-200mg/kg浓度氯霉素的抑制效应明显强于50mg/kg氯霉素,500mg/kg浓度的氯霉素与其它加药组相比,抑制时间和强度都大大增加。在氯霉素影响下,AOA数量有所增长,而AOB数量呈不规则波动;AOA群落结构变化不显著,而AOB群落结构发生显著变化。(2)各浓度组(50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg,400mg/kg)恩诺沙星均未表现出对氨氧化作用明显的抑制效应,但在试验的5-9天内短暂抑制了整体硝化水平,不同浓度加药组之间差异不显著。在恩诺沙星影响下,试验的5-9天内AOA和AOB的数量同时下降了,表明恩诺沙星能短暂抑制AOA和AOB的生长。恩诺沙星影响下,AOA、AOB的群落结构均未发生明显变化,图谱分析表明加药组与对照组保持高的相似性(AOA在71%以上;AOB在84%以上),表明氨氧化微生物的群落结构受恩诺沙星的影响不大。(3)各浓度组(100mg/kg,200mg/kg,500mg/kg)磺胺嘧啶均在整个试验过程中显著抑制了氨氧化作用的进行,不同浓度加药组之间差异不显著;对整体硝化水平有显著抑制作用,但作用比较迟缓,在试验第22天以后才反映出来。在磺胺嘧啶影响下,AOB数量显著下降,但群落结构变化不显著;AOA数量和物种多样性均显著增加了。
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