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目的：原发性肝癌(肝癌)是一种恶性程度高、早期浸润和转移性强的肿瘤,我国发病人数约占全球的55%;在肿瘤相关死亡中仅次于肺癌,位居第二。其病因和发病机制尚未确定。随着原发性肝癌早期诊断、早期治疗,总体疗效已有明显提高。但肝癌术后的高复发与转移仍是制约进一步提高肝癌远期疗效的瓶颈。研究表明上皮间质转化(epithelial mesenchymal transitions, EMT)是肝癌发生侵袭转移的重要原因,但其发生的机制不明。肿瘤细胞高表达甘露糖是其细胞恶变常见的特点之一,因此肿瘤细胞表面甘露糖被认为是肿瘤治疗的一个重要靶点。甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂(Pseudomonasaeruginosa mannose sensitive hamemagglutination vaccine, PA-MSHA)是基因工程合成的表达甘露糖敏感性I型菌毛的灭活绿脓杆菌制剂,被证实能够通过其菌毛识别结合表达甘露糖的肿瘤细胞而发挥普通灭活绿脓杆菌制剂不具有细胞毒作用,是一种新型广谱免疫调节剂。我们前期研究发现PA-MSHA能够通过抑制肝癌EMT的发生而抑制其转移,但是其相关信号通路及作用机制目前尚不明确。本研究欲在前期研究的基础上进一步探索PA-MSHA抑制肝癌EMT发生的分子机制。方法：(1)培养人肝癌细胞株MHCC97L及HepG2,按照需要分为对照组；低剂量PA-MSHA组(1×108/ml)：高剂量PA-MSHA组(2 × 108/ml);高剂量PA-MSHA(2 ×108/ml)+甘露糖(100mM)组。显微镜观察细胞形态学变化,免疫荧光技术及Western Blot检测PA-MSHA作用前后肝癌细胞EMT相关基因及转录因子的表达情况。(2)将5×106/ml肝癌细胞注射于4-6周龄BALB/cnu/nu雄性裸鼠皮下,4周后无菌条件下取出皮下肿瘤,切成2mm大小植入戊巴比妥钠腹腔注射麻醉的裸鼠肝脏。于接种后第3天开始用药,分生理盐水腹腔注射组(0.2ml/d)及PA-MSHA腹腔注射组(0.2ml/d),每组12只。治疗持续40d,于种植后第6周末处死动物。免疫组化及RT-PCR技术检测PA-MSHA治疗前后裸鼠模型肝癌组织E-cadherin及转录因子snail和Pslug表达情况。结果：(1)Western Blot结果显示与对照组相比PA-MSHA治疗组肝癌细胞E-cadherin表达显著增强,而vimentin、fibronecin、NF-κB以及转录因子snail和slug的表达显著降低,其效应呈现剂量依赖性,而外源性甘露糖显著抑制PA-MSHA对上述蛋白的调控作用。免疫荧光也显示PA-MSHA上调肝癌细胞E-cadherin表达而抑制vimentin的表达,显微镜下细胞形态也由不规则的梭形转变为相对规则的卵圆形。(2)免疫组化显示荷瘤裸鼠经PA-MSHA治疗后肝癌组织E-cadherin的表达显著增强,而snail mRNA及slug mRNA的转录则受到显著抑制(P<0.05)。结论：PA-MSHA可以通过识别结合肝细胞癌细胞表面的甘露糖显著抑制肝癌EMT的发生。