论文部分内容阅读
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一种微需氧革兰氏阴性螺旋杆菌,在全球人口中的感染率超过50%。H.pylori感染多发生在儿童时期,如果不经治疗,H.pylori在胃中的持续慢性感染可导致胃炎、消化道溃疡等疾病,并与胃癌、胃黏膜相关性淋巴样组织(MALT)淋巴瘤发生密切相关。研制疫苗将是控制H.pylori感染及相关疾病经济有效的途径。 H.pylori水抽提物中存在着一种能趋化并激活中性白细胞的可溶性蛋白,被称作幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白(H.pylori neutrophil-activating protein,HP-NAP)。HP-NAP位于幽门螺杆菌细胞质中,可通过细菌自溶而释放,并附着在细菌外膜的表面,HP-NAP对高分子量碳水化合物具有特异亲和力,处于这样的位置HP-NAP可能介导幽门螺杆菌粘附于缩主胃黏膜上皮细胞表面。多数H.pylori感染者血清中存在HP-NAP特异抗体,HP-NAP被认为是幽门螺杆菌感染的重要因子和疫苗候选抗原。 本研究利用PCR方法从H.pylori临床分离株MEL-HP27基因组DNA中克隆HP-NAP编码基因HP-napA,利用生物信息技术对HP-napA进行序列分析和功能预测,DNA重组技术构建原核表达载体,并对其编码产物的免疫原性、免疫反应性进行研究,从阻断H.pylori黏附与定植的角度观察HP-NAP在动物模型中的免疫保护效果,以评价其在发展H.pylori基因工程疫苗中的作用,为免疫接种预防H.pylori感染,减少H.pylori相关疾病奠定基础。 实验方法 1.H.pylori MEL-HP27菌株HP-napA基因的分子克隆及序列分析