【摘 要】
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目的明确2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者外周血白介素10(interleukin-10,IL-10)的表达水平及与DNA甲基化的关系,为DN抗炎及表观遗传机制的进一步阐明提供线索。方法选取2017年08月至2018年07月于新乡医学院第一附属医院肾病科及内分泌科住院的51例T2DM合并DN患
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目的明确2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者外周血白介素10(interleukin-10,IL-10)的表达水平及与DNA甲基化的关系,为DN抗炎及表观遗传机制的进一步阐明提供线索。方法选取2017年08月至2018年07月于新乡医学院第一附属医院肾病科及内分泌科住院的51例T2DM合并DN患者作为DN组,其中DNⅢ期21例、DNⅣ期30例。对照组:48例健康体检人员。所有入组研究对象均知情同意并签署知情同意书。收集患者一般资料及生化资料:年龄、性别、病程、血压、血肌酐、血尿素、总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、血钙、24小时尿蛋白定量、超敏C反应蛋白等,同时记录健康体检者相关资料。利用ELISA法检测DN组和对照组外周血IL-10水平,采用实时荧光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,qPCR)法检测两组外周血IL-10 RNA表达水平,使用血液基因组DNA提取试剂盒对两组进行DNA提取,经亚硫酸氢钠处理后送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序。运用统计学软件进行分析,探讨T2DM合并DN患者外周血IL-10的表达水平及与DNA甲基化的关系。结果1.一般资料及生化资料对比:DN组的收缩压、血尿素、血肌酐、空腹血糖水平均高于对照组,且有显著差异(P<0.01)。DN组糖化血红蛋白水平比对照组明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。DNⅢ期患者的血尿素、血肌酐、24小时尿蛋白定量明显低于DNⅣ期患者,有显著差异(P<0.01)。DNⅢ期患者的糖化血红蛋白、肾小球滤过率明显高于DNⅣ期患者,有统计学意义(P<0.05)。DNⅢ期患者的收缩压明显低于DNⅣ期患者,有统计学意义(P<0.05)。2.ELISA检测结果:DN组IL-10表达水平明显低于对照组(P<0.01)。3.qPCR检测结果:与对照组相比,DN组的IL-10RNA表达水平明显降低,且存在显著性差异(P<0.01)。其中,DNⅣ期患者的IL-10RNA水平较DNⅢ期患者升高,有统计学意义(P=0.014);与对照组相比,DNⅢ期与DNⅣ期患者IL-10RNA的表达水平均明显降低,且存在显著性差异(P<0.01)。4.DNA甲基化测序结果:DN组启动子区有稍高水平的DNA甲基化,但与对照组相比没有明显差异。结论T2DM合并DN患者的外周血IL-10蛋白水平及IL-10RNA水平均明显下降,其启动子区有稍高水平的DNA甲基化,可能在DN病程的进展中发挥作用。
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