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pp4519基因是本实验室在肿瘤相关基因筛选过程中,获得的一个新的重金属抗性的蛋白家族成员.通过5RACE的方法获得了该基因全长cDNA序列.序列分析表明,pp4519基因全长1,649 bp,有完整的3端和5端,起始密码子前同一编码框内有终止密码子,poly A前有加尾信号AATAAA.pp4519的开放阅读框含849 bp,编码283个氨基酸,预计分子量为31 kD.经生物信息学分析,发现该基因编码的蛋白和酵母高尔体膜蛋白Yiflp在氨基酸全序列水平上有30﹪的同源.pp451 9的同源物广泛存在于从植物到动物世界不同物种中,结果提示新基因pp4519在生物进化中高度保守.对比cDNA序列与相对应基因组序列,从而将该基因定位于染色体19q13.13.PP4519蛋白的结构特点是含有一个重金属抗性因子的功能域(Hrf+,从41-278位氨基酸),为重金属抗性因子家簇的一新成员.Northern杂交显示该基因的组织表达谱表明,在人的心、脑、胎盘、肝脏、骨骼肌和胰腺中均可检测到一条大小约1.6 Kb转录本,其中在骨骼肌中表达最高,在肺中低表达.RT-PCR结果显示该基因在多种肿瘤细胞系中呈较高水平的表达.利用pp4519-EGFP-N1转染SPC-A1细胞进行亚细胞定位,该基因蛋白定位于细胞质中.半定量RT-PCR,蛋白印迹检测结果表明肺癌及癌旁组织中pp4519 mRNA和蛋白表达无明显差异(P>0.05,P>0.05);免疫组化结果显示PP451 9在人肺癌癌旁组织中的表达略高于肺癌.瞬时转染细胞的流式细胞凋亡检测结果表明该基因具有促进SPC-A1细胞凋亡的作用.SPC-A1肺癌细胞系的体外集落形成试验和生长曲线表明,pp4519转染组集落形成数明显少于空载体组(P<0.05);转染pp4519的SPC-A1肺癌细胞的增长速度慢于对照组细胞(P<0.05);转染pp4519基因的肺癌细胞系的裸鼠体内成瘤试验结果表明该基因对SPC-A1细胞系的成瘤有明显抑制作用(P<0.01).