近年来许多研究已经证实，在骨髓、外周血、脐血、胚胎组织等部位存在一类祖细胞的亚型，该类细胞能分化为成熟的血管内皮细胞，具有胚胎血管母细胞的特征，被命名为血管内皮祖细胞（Endothelial Progenitor Cells,EPCs）。EPCs不仅参与胚胎血管发生，而且参与成体血管发生，因此 EPCs在许多疾病的发病过程中具有重要作用。目前尤其引起人们兴趣的是，EPCs在肿瘤血管新生过程中的作用。恶性肿瘤的生长转移与肿瘤新生血管形成密切相关。神经胶质瘤是神经系统最为常见的恶性肿瘤，也是最难治疗的恶性肿瘤之一，而且其突出的特点是血管化程度较高。因此，深入研究EPCs对神经胶质瘤的作用具有重要的临床意义。本研究设计三部分实验对骨髓EPCs及神经胶质瘤进行初步研究。　　第一部分大鼠骨髓内皮祖细胞的分离培养及其生物学特性　　目的:探讨大鼠骨髓EPCs的分离培养方法和生物学特性。　　方法:密度梯度离心法分离大鼠骨髓EPCs，二次贴壁法体外扩增培养EPCs；MTT法观测EPCs的增殖能力；免疫荧光检测细胞抗原CD133、CD34、Flk1、CD31的表达情况；流式细胞术动态观测细胞抗原CD133的变化；三维培养原代EPCs（第10d）并观测其体外成血管能力。　　结果:(1)细胞培养第4d出现集落样生长，呈圆形或梭形，第10d细胞长满瓶底，呈鹅卵石样外观；(2)免疫荧光检测结果显示，第2d细胞表面抗原CD133、CD34、Flk1表达阳性，CD31表达阴性；第21d CD34、CD31、Flk1表达阳性，CD133表达阴性；(3)流式细胞术检测结果显示，第10、15、20、21d骨髓 EPCs细胞表面抗原CD133阳性率分别为46.8％、18.1%、2.73%、1.58%；阴性对照为0.99%；(4)三维培养在胶原内有“出芽式”生长现象及管腔样结构形成。　　结论:成功从大鼠骨髓中分离、培养出EPCs；三维培养骨髓EPCs证实其具有体外成血管能力。　　第二部分大鼠骨髓内皮祖细胞移植到裸鼠体内的分化　　目的:研究骨髓EPCs在裸鼠体内的分化情况，进一步揭示其生物学特性。　　方法:二次贴壁法体外扩增培养EPCs；Hoechst33342标记原代（第10d）EPCs，收集 EPCs注射到裸鼠背部两侧皮下（同时用 PBS液代替细胞悬液作为阴性对照），SPF级饲养动物，观测注射部位的变化及 EPCs形成物的大小，并绘制生长曲线；细胞移植到裸鼠皮下第50d时，处死动物，完整剥离EPCs形成的皮下肿物，进行HE染色及免疫荧光染色，观察EPCs分化情况，并检测细胞CD31、Flk1、CD34的表达情况。　　结果:皮下接种EPCs第20d时，肉眼观察到0.13 cm2球形皮下肿物，之后皮下肿物逐渐增大；HE染色观察到该组织内有管腔样结构、肌肉样组织及脂肪样细胞，荧光显微镜下可见Hoechst标记的细胞；免疫荧光检测显示，细胞抗原CD31、Flk1、CD34表达阳性，而且有些细胞同时具有Hoechst标记。　　结论:大鼠骨髓EPCs移植到裸鼠体内一部分分化为内皮样细胞，并形成管腔样结构，另一部分分化为非内皮系细胞。