丹参次生代谢物的组织化学定位及生物运转探讨

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本文以三个不同引种地丹参为材料,研究脂溶性成分在丹参植株不同组织中的定位,并结合高效液相色谱技术分析成分的差异;以不同生长时期丹参为材料,通过对丹参水溶性有效成分即酚类化合物在不同时期的动态组织化学定位及丹酚酸B含量的动态检测,揭示其在丹参植株各部位的合成积累规律及确切定位,为丹参中酚类化合物的生物合成及运转途径研究提供部分试验依据,为调控丹参有效成分的合成积累和规范化生产提供理论依据。1.为了说明丹参茎、叶中是否含有脂溶性成分以及不同引种地丹参不同部位脂溶性成分的差异性,采用了二萜醌类化合物的组织化学定位和HPLC图谱分析方法,对3个不同引种地丹参样品的根、茎、叶分别进行分析,结果表明丹参茎、叶中都含有二萜醌类脂溶性成分,但主成分不是已知的丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ和二氢丹参酮Ⅰ,脂溶性成分定位于皮层,但同一品种不同引种地丹参茎、叶所含的脂溶性成分均有差异;丹参根的脂溶性成分位于周皮细胞中,同一品种不同引种地丹参根中的脂溶性成分相同。说明丹参地上部分(茎、叶)含有脂溶性成分的种类与引种地有关,根的脂溶性成分的种类与引种地无关。2.为了说明丹参不同生长时期水溶性酚类化合物的产生及其定位变化,采用酚类化合物组织化学定位方法研究了9个不同生长期的丹参酚类化合物在根、叶中的变化,并应用HPLC图谱分析了不同时期根、茎、叶中的水溶性成分,结果表明丹参根、茎、叶中均含有水溶性化合物,不同生长时期其所含的种类和含量有所不同。不同生长时期茎、叶中均含水溶性成分迷迭香酸和丹酚酸B,但不同生长时期的丹酚酸B含量不尽相同;除萌发期和发芽期外丹参根在其余时期均含丹酚酸B,且其含量随丹参的生长不断升高,在枯萎期有所降低。不同生长时期丹参根、叶中酚类化合物均定位于细胞质膜上,在叶中主要定位在表皮细胞的细胞质膜上,在根中主要在周皮木栓形成层和栓内层的细胞质膜上,也有少量沉淀在其液泡中观察到。3.为了探讨丹参中丹酚酸B的运转方式,采用HPLC定量分析丹酚酸B的方法对不同生长天数的丹参根、叶进行分析,并用DPS软件进行灰色关联分析,结果表明丹参水溶性成分丹酚酸B最初在叶中合成,边合成边通过茎输送到根中,在叶间是相互运输的,距离较近或次近的叶间相互运输量的趋势基本一致,根和植株地上部分中部的叶的运输量趋势基本一致;植株地上部分下部和上部的叶运输量和根的运输量差异较大,即某一方向的运输量较多而另一方向的运输量较少;枯萎期后,由于作为合成部位的叶萎蔫而造成了丹酚酸B合成量的减少,在根中部分的丹酚酸B分解而使丹酚酸B最终在根中贮藏的量少于植物茂盛生长时期的量。
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