【摘 要】
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犬新孢子虫（Neospora caninum）为专性细胞内寄生原虫,可以引起孕牛流产和神经系统障碍,终末宿主是犬,多种动物都可作为中间宿主。新孢子虫病（Neosporiasis）对牛的危害最为严重,目前犬新孢子虫已成为全世界牛流产的主要原因之一,每年因新孢子虫病造成养牛业的全球经济损失巨大。虽然国内外对犬新孢子虫的研究取得了一定进展,但犬新孢子虫对雄性小鼠生殖系统的损伤作用还不清楚。本研究以牛源犬
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犬新孢子虫（Neospora caninum）为专性细胞内寄生原虫,可以引起孕牛流产和神经系统障碍,终末宿主是犬,多种动物都可作为中间宿主。新孢子虫病（Neosporiasis）对牛的危害最为严重,目前犬新孢子虫已成为全世界牛流产的主要原因之一,每年因新孢子虫病造成养牛业的全球经济损失巨大。虽然国内外对犬新孢子虫的研究取得了一定进展,但犬新孢子虫对雄性小鼠生殖系统的损伤作用还不清楚。本研究以牛源犬新孢子虫雄性BALB/c小鼠动物模型为研究对象,对雄性模型小鼠生殖系统进行脏器系数测定;病理组织学观察睾丸和附睾的病理变化,透射电镜观察睾丸和附睾的细胞结构变化;Western blot和IHC检测生精细胞凋亡相关蛋白p53和Caspase-3表达情况;统计精子密度、精子活力及精子畸形率;ELISA法测定睾丸组织匀浆中抗精子抗体（AsAb）和NO浓度;通过繁殖试验,统计雌鼠受孕率和活胎数等,并检测F1代仔鼠发育指标。结果显示,雄性BALB/c小鼠攻虫后,表现出共济失调等典型临床症状,并在心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸、附睾及精液中PCR检测出Nc-5基因条带,说明成功建立了牛源犬新孢子虫雄性BALB/c小鼠动物模型。模型组雄性小鼠的睾丸系数和附睾系数与对照组比较,差异显著（P<0.05）;模型组雄性小鼠与对照组比较,睾丸、附睾的病理学和超微结构观察,发现各组织细胞均出现不同程度病变。Western blot法检测模型组雄性小鼠睾丸中p53蛋白表达水平与对照组比较,极显著上调（P<0.01）,Caspase-3蛋白表达水平与对照组比较,显著上调（P<0.05）。经免疫组化检测,模型组雄性小鼠睾丸、附睾中p53蛋白和Caspase-3蛋白表达水平与对照组比较,均显著上调（P<0.05）。镜检观察精子发现,模型组与对照组比较,精子数量明显减少,精子活力显著降低;经统计学分析,模型组与对照组比较,精子密度、精子活力及精子畸形数均具有极显著性差异（P<0.01）。模型组与对照组比较,雄性小鼠睾丸匀浆中As-Ab浓度显著上调（P<0.05）,NO浓度极显著上调（P<0.01）。雄性模型小鼠和雄性健康小鼠分别与健康雌鼠合笼后,模型组的受孕率、产仔数、活胎数与对照组比较显著下降;模型组与对照组比较,胎鼠的平均体重差异极显著（P<0.01）;F1仔鼠雌/雄性别比例无显著性差异（P>0.05）。综上所述,牛源犬新孢子虫对雄性小鼠的生殖系统具有一定的损伤作用。本研究为犬新孢子虫致病机制的揭示奠定了基础。
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