金纳米探针的电泳分析及其在检测上的应用

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xfh99620
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
金纳米粒子具有小尺寸效应、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和效应,这些效应使得金纳米粒子广泛应用于临床医学、材料学等领域,目前,金标记技术在医学检验领域已经成为四大标记技术之一。表面结合了核酸或蛋白质的金纳米粒子在生物医学方面具有非常广泛的应用,为了更好地应用金纳米探针,需要对这种金纳米探针进行分析表征,目前主要是应用电镜技术,但这种技术操作比较烦琐、条件苛刻、仪器昂贵。这就需要发展一些相对简单的方法来对金纳米探针进行分析表征。本论文引入两种表面调控分子巯基己醇(MCH)和4-巯基苯甲酸(MBA),分别和金纳米粒子表面包被的核酸进行配体交换反应,在金纳米粒子表面形成二元单分子层,从而得到了表面含有MBA-DNA和MCH-DNA的金纳米粒子,即为我们所制备的金纳米探针。用凝胶电泳法、毛细管电泳法和荧光淬灭法对这种金纳米探针进行了分析表征。在凝胶电泳表征中,首先通过实验对凝胶的浓度进行了选择,并分析了金纳米粒子的粒径对分离的影响;在对金纳米探针的表征中,不仅分析了表面结合的DNA的数量对分离的影响,还详细讨论了结合的MCH的数量和MBA的数量对分离的影响;对MBA取代DNA和DNA取代MBA进行了对比实验。实验结果表明琼脂糖凝胶电泳分析的最佳浓度是2%;金纳米粒子的粒径越小其电泳迁移率就越大;金纳米粒子表面结合的DNA越多,其迁移率越小;随着MCH的量的增加,电泳迁移率先减小后增大,但MCH量过大时易使金纳米粒子发生凝聚;随着MBA的量的增加,电泳迁移率增大,含有MBA的二元单分子层能使金纳米粒子稳定地分散于水溶液;在对比实验中发现DNA取代MBA比MBA取代DNA更容易。在毛细管电泳表征中,我们实验所制备的两种金纳米探针(MBA包被的金纳米粒子和DNA包被的金纳米粒子)以1:1的比例混合后在毛细管电泳中无法分离,但在毛细管凝胶电泳中则得到了有效的分离。本论文发现金纳米粒子在荧光素溶液中可以增强荧光强度。在荧光素溶液中加入低浓度的金纳米粒子可以增强荧光素溶液的荧光3-10倍,在氨甲基芘溶液中加入金纳米粒子能增强氨甲基芘的荧光强度30倍,逐渐增大金纳米粒子的浓度又会引起这种荧光增强的减弱直至荧光淬灭,这种荧光增强和荧光淬灭之间的联系无人提及。荧光淬灭目前已广泛应用于核酸和蛋白质的定性、定量研究、利用荧光供体和受体之间距离变化所引起的能量转移作为标尺对纳米尺度的距离进行测量等方面。本论文一方面讨论了DNA的链长和金纳米粒子的粒径对荧光淬灭的影响,另一方面利用荧光淬灭法对核酸进行了检测,检测限可以达到nM级。
其他文献
改革开放以来,我国高等法学教育取得了长足进展。法学教育规模持续扩大,逐步从"精英式"向大众化法学教育体制转变;法科学位与研究生教育结构不断调整,逐步从以法律通识教育为
目的为了进一步提高我院肺结核护理的效率和质量,提高患者对我院护理服务的满意度,笔者就如何提高肺结核的护理质量进行了系统的分析和探讨,并结合护理体会提出了几点建议。
松香是一种天然可再生树脂,主要成分为枞酸、长叶松酸和新枞酸等多种树脂酸,利用树脂酸中的两个双键和一个羧基可对松香进行改性。随着人们对松香及松香衍生物的深入研究,松香深
详细介绍了PFS-WM楔式流量计的原理、计算公式、以及所具有的特点和优点,并对其在兰州石化公司延迟焦化装置应用中出现的问题做了认真的研究分析,找出了造成误差较大的原因,
介绍了目前常用的新型绿色给排水管材,分析了不同管材的性能特点以及管道布置和敷设要点;对行业存在的问题提出了相应对策。
由于电解法制备臭氧的主要缺点在于生产单位臭氧的能耗较高,而要解决该问题的关键在于提高电极的性能,因此新型电极的研究或对电极制备条件的完善仍是研究的根本所在。本文在
低低温电除尘技术是实现燃煤电厂节能减排的有效技术之一,可进一步扩大电除尘器的适用范围,满足新环保标准要求,并可去除烟气中大部分的SO3,此技术在国外得到了工程实践的考
目前建筑市场上费用承包的形式越来越普遍,因费用承包的合作双方关系较为松散,极易给企业带来各种经营风险,本文分两个部分分别说明与合作队伍在合作过程中存在的资金风险和
针对油井所处位置的不确定性,为单个油井配置计量站比较浪费的状况,设计了一种应用于油井井口计量的撬装式三相分离计量装置,可以由拖车灵活地进行移动,对特殊位置油井的产量
知识传递的四种模式分别为内隐知识到内隐知识、内隐知识到外显知识、外显知识到外显知识、外正知识到内隐知识。结合知识传递的规律及《管理学》教学实践,探讨了教学改革的“