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目的：肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，严重危害着人类的健康，而目前认为最重要的致癌因素之一就是癌基因与抑癌基因的突变。根据近年来研究成果得出，DKK1基因在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用，但其在肺癌中的作用尚不清楚，因此在本实验中将对DKK1基因在肺癌细胞株中的生物学作用进行初步探讨。在本次实验中我们首先利用分子克隆技术构建DKK1的真核细胞表达载体，以此筛选建立稳定转染DKK1表达载体的肺癌细胞株,进而初步探讨DKK1对肺癌细胞株95-C迁移能力及侵袭能力的影响。方法：1应用分子克隆技术，构建PCMV-Tag-2b-DKK1质粒，为后续实验奠定基础。2应用Western Blot及RT-PCR法验证pCMV-Tag-2b-DKK1转染95C细胞后DKK1蛋白及mRNA表达水平，并以转染空载体及未转染载体的95C细胞作为阴性对照；3应用划痕试验检测肺癌细胞株95C经转染pCMV-Tag-2b-DKK1后，其迁移能力的改变情况，并以转染空载体及未转染载体的95C细胞作为阴性对照；4应用Boyden Chamber法测定肺癌细胞株95C经转染pCMV-Tag-2b-DKK1后，其侵袭能力的改变情况，并以转染空载体及未转染载体的95C细胞作为阴性对照；结果：1应用分子克隆技术成功构建了PCMV-Tag-2b-DKK1真核表达质粒，并经酶切和DNA测序分析得到确认。2分别应用RT-PCR和Western Blot在95C细胞株中证实了转染pCMV-Tag-2b-DKK1的细胞系成功表达了DKK1蛋白；初步建立了稳定转染95-C-pCMV-Tag-2b-DKK1细胞株；3在95C细胞株中分别转染pCMV-Tag-2b-DKK1及空载体，应用划痕试验检测分析发现，转染pCMV-Tag-2b-DKK148小时后的95-C细胞的抑制率分别为16%，明显低于转染PCMV-Tag-2b组和空白对照组的细胞的抑制率62%和55%(P=0.000)；4在95C细胞株中分别转染pCMV-Tag-2b-DKK1及空载体，应用Boyden小室检测分析发现，转染pCMV-Tag-2b-DKK1的细胞株侵袭穿过基底膜的平均细胞数目为85.92，明显高于转染PCMV-Tag-2b组和空白对照组的侵袭细胞数目22.52和38.37(P=0.000)。结论：1成功构建了pCMV-Tag-2b-DKK1真核细胞表达载体，并建立了稳定转染的95-C-pCMV-Tag-2b-DKK1细胞株，为进一步深入研究DKK1的生物学功能奠定了基础；2pCMV-Tag-2b-DKK1转染后使人肺癌细胞株95-C的迁移及侵袭能力增强，提示DKK1可能与肺癌的侵袭转移有关。