反刍动物体内胆碱的来源主要有三种:一是饲料中的胆碱,动物可以通过采食饲料获得胆碱;二是瘤胃微生物合成的胆碱;三是反刍动物通过体内甲基化途径自身合成的胆碱。由于瘤胃微生物的分解作用以及反刍动物自身能够合成胆碱,对反刍动物胆碱营养的研究很少,一般认为不需要从日粮中额外供给。但有试验研究表明,泌乳早期的高产奶牛可能存在胆碱营养的不足,对其补饲胆碱后观察到不同程度的生产性能的改善。本课题通过3个试验,分别从体内饲喂和体外培养两个方面研究了适宜奶牛生产的胆碱添加量。1、试验采用随机区组设计,按胎次、预产期、体重、上一胎次产奶量等基本一致的原则选择40头荷尔斯坦奶牛,进行随机分组,共分成4组,每组10头,研究不同胆碱添加梯度对奶牛泌乳性能和血液指标的影响。试验处理为每头每天添加氯化胆碱0、15、30、45 g(氯化胆碱含量分别为0、7.5、15、22.5 g)。试验结果表明,添加胆碱后,对奶牛的产奶量和乳成分均没有显著影响(P>0.05);血浆葡萄糖含量试验组均高于对照组,但是差异不显著(P>0.05);30天后,在添加45g/d胆碱时,血浆β-羟丁酸明显降低(P<0.05);对于血浆中的胆固醇,添加45g/d胆碱组在数值上明显低于其他三组,差异极显著(P<0.01);对于血浆中的谷丙转氨酶,添加45g/d胆碱组在数值上低于对照组,差异极显著(P<0.01);对于谷草转氨酶,添加45g/d胆碱组在数值上低于对照组,但差异不显著(P>0.05)。由此可见,直接饲喂氯化胆碱能在一定程度上提高奶牛的生产性能,大部分试验指标均在胆碱的最高添加量45g/d时出现显著性差异,因此该胆碱添加量不能代表胆碱的最适宜添加浓度,需要进一步加大胆碱的喂量来确定其适宜添加量。2、选择4头胎次、预产期、产奶量相近的荷斯坦牛,4×4拉丁方试验设计,试验处理为每头每天添加过瘤胃胆碱0、30、60或90 g(氯化胆碱含量分别为0、7.5、15、22.5 g)。试验共分为4期,每期15天。试验结果表明,补饲过瘤胃胆碱对奶牛的产奶量、乳糖和乳蛋白含量无显著影响(P>0.05);乳脂率随着过瘤胃胆碱添加量的增加显著升高(P<0.05),在30和60g/d时达到最高水平,两组间差异不显著。添加过瘤胃胆碱对血浆中葡萄糖、高密度脂蛋白、β-羟丁酸、总氨基酸、甘油三酯和胆固醇的浓度没有显著影响(P>0.05),有提高血浆低密度脂蛋白的趋势。添加过瘤胃胆碱降低了血浆NEFA浓度,各添加组显著低于对照组,以添加60g/d时血浆NEFA浓度最低。本试验结果显示,泌乳早期奶牛日粮添加过瘤胃胆碱有提高肝脏脂肪输出能力的作用,将更多的脂肪酸分配到外周体组织代谢,进而促进乳脂合成和降低脂肪在肝脏沉积的风险。由本试验得出的结论是泌乳早期奶牛的最适宜过瘤胃胆碱添加量是60g/ d,实际氯化胆碱含量为15 g/d。3、以常规日粮作为基础发酵底物,采用体外培养的方法,研究不同胆碱添加量对瘤胃微生物代谢和繁殖性能的影响及其作用的机理。试验共设5个处理组,每组3个重复,5种处理水平分别为:底物+0、10、20、30、40mg氯化胆碱,其中底物添加量为10g。通过对发酵8小时后pH、氨氮、挥发性脂肪酸和菌体蛋白指标的测定,没有观察到不同浓度的胆碱对各个发酵指标的影响,可能与底物中胆碱的量已经满足了微生物的需要有关。另外,反刍动物瘤胃内环境复杂,受多因素的影响,应进一步试验,根据日粮组成、畜种等因素的不同而得出较合理的添加量。