【摘 要】
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肠道中葡萄糖的转运与吸收主要依靠小肠粘膜上皮细胞中的两个糖转运蛋白GLUT2、GLUT5协作实现。尾侧型同源盒基因Cdxa特异表达于消化系统的十二指肠至直肠中,作为转录因子对
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肠道中葡萄糖的转运与吸收主要依靠小肠粘膜上皮细胞中的两个糖转运蛋白GLUT2、GLUT5协作实现。尾侧型同源盒基因Cdxa特异表达于消化系统的十二指肠至直肠中,作为转录因子对多种基因的表达有潜在的调控作用。为探明Cdxa转录因子对肠道内两个糖转运蛋白的调控机制,本试验通过生物信息学对Cdxa转录因子的疏水性、等电点、蛋白结构等进行分析,并使用Modulemaster.TFbind等软件对GLUT2与GLUT5两个功能基因上游顺式元件序列中Cdxa的结合位点分析预测。通过构建pcDNA3.1-Cdxa真核表达载体后,转染至人工培养的鸡小肠上皮细胞中,转染24h后观察细胞形态,并通过实时定量PCR对转染细胞中的Cdxa及GLUT5、GLUT2基因的表达量测定。发现Cdxa基因的阳性组相比阴性对照组与空白对照组中的表达量提升,且差异极显著(P<0.01),而阴性组与空白组间差异不显著(P>0.05),提示pcDNA3.1-Cdxa表达载体成功构建转染并在鸡小肠上皮细胞中表达；GLUT2基因阳性组相比阴性组与空白组表达量下降,差异显著(0.01
0.05),表明Cdxa转录因子与GLIT2基因的表达呈负相关,对其有负调控作用;而各细胞组之间GLUT5基因差异不显著(P>0.05),表明Cd×a转录因子对GLUT5基因的表达无明显影响。
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