碳青霉烯耐药/头孢敏感的铜绿假单胞菌的临床风险分析及其分子标志物检测

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目的分析碳青霉烯耐药/头孢敏感的铜绿假单胞(Carbapenem-resistant and cephalosporin-susceptible Pseudomonas aeruginosa,Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa)侵入血液的危险因素及死亡风险,并检测其可能的分子标志物,为临床预防及控制感染提供理论依据。方法1.Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa的临床风险分析:根据药敏结果,将重庆医科大学附属第一医院2011年1月至2017年12月期间的铜绿假单胞菌菌血症患者分为两组:Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa菌血症组(病例组I),碳青霉烯和头孢敏感的铜绿假单胞菌(Carbapenemsusceptible and cephalosporin-susceptible Pseudomonas aeruginosa,Carb-S/Ceph-S P.aeruginosa)菌血症组(病例组II)。并且,以同期的血培养阴性患者为对照组。采用病例-病例-对照分析方法,分析致患者感染的危险因素。同时比较病例组I和病例组II患者30天内的死亡情况,分析致菌血症患者死亡的危险因素。2.Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa的分子标志物检测:采用PCR法检测Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)相关基因和碳青霉烯酶相关基因的携带情况;采用RT-PCR法检测Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa AmpC酶、膜孔蛋白OprD和外排泵的表达情况。结果1.Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa菌血症患者的临床风险分析:1.1基本资料:根据抗生素药敏结果,从203例铜绿假单胞菌菌血症患者中,共筛选出Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa菌血症患者63名,其中57.1%的患者来源于外科病区,排名前三位的疾病为肝胆疾病、血液肿瘤和胃肠道疾病。1.2不同菌血症组的危险因素分析:30天之内再次入院,中心静脉置管和碳青霉烯类抗生素的使用为病例组I的独立危险因素;患血液肿瘤疾病为病例组II的独立危险因素;另外,接受完全肠外营养为两种表型铜绿假单胞菌菌血症的共同危险因素。1.3不同菌血症组的临床预后分析:30天内病例组I的死亡率为27%(17/63),明显高于病例组II(12.7%,8/63),差异有统计学意义。入住ICU和感染性休克为促进P.aeruginosa菌血症患者死亡的独立危险因素。2.Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa的分子标志物检测结果:63株Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa均未检测到ESBLs和碳青霉烯酶相关基因;RT-PCR检测结果显示,与参考菌株PA01相比,4株Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa AmpC酶,外排泵相关基因MexF、MexY的表达量无明显增加,膜孔蛋白OprD的表达量明显下降,3株Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa外排泵相关基因MexB和2株Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa外排泵相关基因MexD的表达量明显增加。结论30天之内再次入院,中心静脉置管,完全肠外营养和碳青霉烯类抗生素的使用为导致Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa菌血症的独立危险因素;Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa的外排泵相关基因MexB、MexD表达增加,膜孔蛋白OprD表达下调;碳青霉烯类抗生素的使用可能与Carb-R/Ceph-S P.aeruginosa的出现有关。
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