对叶大戟种籽不饱和脂肪酸提取及生物活性研究

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目的:通过对叶大戟种籽不饱和脂肪酸提取及生物活性研究,阐明该植物的药效物质基础,扩展应用领域,增加附加值提供理论依据。方法:(1)采用GB/T法测定对叶大戟种籽粗脂肪及油脂特性;采用气象色谱-质谱联用(GC-MS)法鉴定化学成分,归一化法测定各成分相对含量。(2)采用索氏,微波,超声,SFE方法提取对叶大戟种籽油脂成分,筛选合理提取方法;(3)采用尿素包合法纯化不饱和脂肪酸;(4)采用体外清除ABTS+自由基活性测定方法,考察不同提取方法所得对叶大戟种籽油脂成分抗氧化活性;(5)采用Morris水迷宫和避暗实验方法,观察对叶大戟种籽不饱和脂肪酸改善小鼠学习记忆力功能活性;结果:(1)通过GB/T法测定对叶大戟种籽粗脂肪含量为32.03%,其主要油脂成分是棕搁酸,硬脂酸,油酸,亚油酸,a-亚麻酸等脂肪酸。对叶大戟种籽油脂的比重值为0.9013,酸值1.17,皂化值为208,碘值高达152.9,过氧化值1.7。(2)索氏提取方法所得油脂提取率33.39%,酸值9.06;超声提取方法所得油脂提取率30.5%,酸值10.57;微波提取方法所得油脂提取率31.85%,酸值1.17;SFE萃取方法所得油脂提取率32.3%,酸值1.02;(3)采用尿素包合法纯化多不包合脂肪酸,在脂肪酸,尿素和甲醇比例为1:3:8,温度为-24~-26℃,时间为24h的条件下包合,GC-MS分析检测结果显示,其不饱和脂肪酸含量接近98%, a-亚麻酸含量达到94.62%;(4)对四种提取方法所得到油脂进行抗氧化活性,抗氧化活性大小顺序为,索氏提取>SFE萃取>超声提取>微波提取。(5)将纯化得到的对叶大戟种籽不饱和脂肪酸及非油脂组分进行改善小鼠学习记忆力功能活性实验,结果表明,不饱和脂肪酸具有改善学习记忆力功能的活性。结论:对叶大戟种籽油脂主要成分是棕搁酸,硬脂酸,油酸,亚油酸,a-亚麻酸等脂肪酸,其中被认为人体必需脂肪酸a-亚麻酸和亚油酸含量达到68%;三种溶剂提取方法中,以提取率和酸值综合考虑,微波提取法合理;非溶剂提取法(SFE萃取法)与溶剂提取法比较,提取率差别不明显,酸值均低于溶剂提取法而且SFE为绿色(无溶剂残留)提取法,因此,SFE为合理提取方法;尿素包合法富集不包合脂肪酸的有效方法;对叶大戟种籽不饱和脂肪酸成分具有体外抗氧化和改善学习记忆力功能的活性。
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