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目的:观察环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的Sprague Dawley(S D)大鼠肝细胞癌发生的抑制作用,同时检测COX-2、PTEN、PDCD4在肝组织及癌组织中的表达,探讨Celecoxib抑制肝细胞癌形成的机制。方法:将90只雄性SD大鼠随机分为3组,实验组(35只):每周称量大鼠体重并按50mg/kg的剂量腹腔内注射DEN溶液(浓度为5mg/ml)一次,同时按大鼠体重每天给予大鼠灌胃50mg/kg的实验剂量的塞来昔布;建模组(35只):除了和实验组一样腹腔内注射DEN溶液外,同时按大鼠体重每天给予大鼠灌胃2ml/kg的实验剂量的生理盐水;正常组(20只):按大鼠体重每天给予大鼠灌胃2ml/kg的剂量的生理盐水外并按10ml/kg的剂量每周腹腔注射一次生理盐水。20周后全部处死大鼠,成瘤的大鼠取肿瘤组织,未成瘤的大鼠取肝组织,每只大鼠组织分为两份,一份大鼠肝脏用中性福尔马林固定24h后,包埋做成蜡块,并进行HE染色;另一份新鲜组织冻存于液氮,并用RT-PCR和WB方法检测大鼠肝组织中COX-2、P TEN、PDCD4的m RNA和蛋白表达情况。结果:1.大鼠成瘤率比较:实验过程中,分别于第8和第16周每组随机处死大鼠5只,第8周解剖后发现,正常组大鼠和实验组大鼠肝脏无异常,建模组有2只大鼠肝脏上发现硬化结节;第16周解剖后发现,正常组大鼠肝脏仍无异常;实验组2只大鼠肝脏形成肿物;建模组5只大鼠肝脏上均形成肿物。以上大鼠只是为了追踪实验过程,不用于成瘤实验后的实验研究。实验过程中,正常组大鼠无死亡,建模组有6只大鼠异常死亡,解剖发现死亡原因为腹腔内大量腹水,考虑为肝衰竭引起的死亡;实验组有2只异常死亡,怀疑死于肠坏死。20周后处死所有剩余大鼠,解剖后发现正常组大鼠肝组织无异常;建模组剩余19只大鼠,14只形成肿物,HE染色后证实为肝癌,2只解剖后HE染色后证实为肝硬化;实验组23只存活大鼠中13只大鼠肝部有肿物形成,HE染色后证实为肝癌,10只肝部无肿物形成,其中3只病理证实为肝硬化,7只无明显异常。实验组诱导生成肝癌的大鼠成瘤率低于建模组,差异具有统计学意义(43.48%VS73.68%,P<0.05)。2.RT-PCR检测三组肝组织中COX-2、PTEN和PDCD4 m RNA表达量:建模组的肝组织COX-2m RNA表达量高于正常组和实验组的肝组织COX-2m RNA表达量,差异有统计学意义(P<0.05),空白组和实验组的肝组织CO X-2m RNA表达量无差异;建模组的肝组织的PTENm RNA和PDCD4m RNA表达量低于空白组和实验组的肝组织PTENm RNA表达量,差异有统计学意义(P<0.05),正常组和实验组的肝组织PTENm RNA和PDCD4m RNA表达量无差异。3.WB检测三组肝组织中COX-2、PTEN和PDCD4蛋白表达量:建模组的肝脏组织COX-2蛋白表达量高于正常组和实验组的肝脏组织中的COX-2蛋白表量,差异分别具有统计学意义(P<0.05),正常组和实验组的肝脏组织的COX-2蛋白表达量无差异;建模组的肝组织的PTEN和PDCD4蛋白表达量低于正常组和实验组,差异有统计学意义(P<0.05),而正常组和实验组的肝组织PTEN和PDCD4蛋白表达量无差异。结论:1.COX-2抑制剂Celecoxib可预防DEN诱导的SD大鼠肝癌的发生2.COX-2抑制剂Celecoxib预防肝癌的发生可能是通过上调PTEN和PDCD4的表达发生作用。