从本实验室构建的家蚕蛹期cDNA文库中获得一条EST序列，经生物信息学分析后初步确定为一未知基因，命名为家蚕Bm59.(Bomby.mor.595)，GenBank登陆号为DY230615。家蚕Bm595基因由一个外显子组成，ORF长为714bp，编码237个氨基酸残基，该蛋白的预测分子量大小为26 kD，等电点为4.64。从NCBI数据库中利用Blast检索，发现Bm595蛋白与已知蛋白没有同源性，与其他假想或者预测蛋白的同源性都低于30％，说明Bm595蛋白是一个结构和功能未知的蛋白。　　 将扩增到的Bm595基因克隆到融合表达载体pET-28a相应的酶切位点，得到融合蛋白表达质粒pET-28a-Bm595，经PCR、酶切鉴定验证重组成功。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，用终浓度.mM的IPTG诱导重组菌表达后，SDS-PAGE分析表明在3.kDa左右的位置有一条特异性蛋白条带，与预期值30 kDa(融合标签分子量3 kDa，Bm595理论分子量26 kDa)相符。融合蛋白以包涵体形式存在，通过摸索包涵体处理条件，菌体用含0.8％十二烷基肌氨酸钠的裂解液处理后超声破碎，部分重组蛋白溶解在上清中。12，00.rpm离心所得的上清以亲和层析的方法纯化目的蛋白His-Bm595。经FPLC反相柱层析进一步纯化后，再进行质谱分析，得到该融合蛋白的分子量为30，626 Da，证实了该蛋白表达的正确性。以纯化所得蛋白为抗原免疫雄性新西兰兔，制备了该重组蛋白的多克隆抗体，多克隆抗体经Protei.A柱纯化，间接ELISA检测该抗体效价在抗原浓度为10μg时可达1：16，000。　　 提取家蚕4个发育时期和五龄幼虫头部、脂肪体、肠、马氏管、睾丸、丝腺、表皮和气门等8个组织的总RNA和蛋白，用于荧光定量PCR和Westernblotting实验。分析Bm595基因在家蚕不同时期和五龄幼虫不同组织中的转录差异和表达情况。实验结果表明，Bm595基因在家蚕四个发育时期中的转录情况存在较大差异，其中五龄幼虫中最高，卵中最低。Bm595基因在家蚕五龄幼虫各组织中的转录由高到低依次为：睾丸、丝腺、肠、头、卵巢、脂肪体、表皮、气门。在表达水平方面，睾丸的表达量最高，其次是丝腺和头，脂肪体也有较明显的表达。而在其他组织中没有检测到该蛋白的存在。　　 以家蚕卵巢细胞系Bm5细胞进行免疫细胞化学实验，结果显示，在分裂和未分裂的细胞中，Bm595蛋白主要分布于细胞核内。上述这些研究为以后对该基因功能和结构方面的进一步深入研究奠定了基础。