利用甲基弯菌(Methylosinus trichosporium) IMV 3011合成甲烷氧化菌素(Methanobactin, mb),确立最佳发酵条件,建立了初步的甲烷氧化菌素分离富集方法,并对其抗氧化活性进行研究。甲烷氧化菌的甲烷单加氧酶(particulate methan monooxygenase, pMMO)能够催化丙烯氧化成环氧丙烷。由于在有铜的存在下,mb会捕获铜并将其带入细胞传递给pMMO,构建其活性中心。采用气相色谱测定甲基弯菌IMV 3011在有无铜培养的条件下pMMO活性的改变,并分析了mb和pMMO活性的关系。对比3011的生长曲线和相对应的mb积累曲线,确定最佳培养时间为4天。在研究培养基中CuSO4的添加量对细胞生长和分泌mb的影响的实验中,确定在培养基中CuSO4的含量为0.5μmol/L时,mb的产量相对最大。其中,全波长扫描测得mb在280nm处有吸收峰,该波长用于实验中mb的定量及含量比较。碳源的选择,对比甲烷、甲醇培养3011在细胞形态、细胞生长及mb产量,发现经过甲醇驯化后的细菌形态上基本没有变化,且甲醇作为碳源进行发酵罐培养3011时,细胞的生长及mb的积累均要好于甲烷摇床培养。采用HP-20大孔吸附树脂的静态吸附法进行mb富集实验。通过单因素实验,确定10mL大孔树脂最佳上样量为500mL,最佳吸附时间为5h,洗脱剂的用量为20mL,大孔树脂最佳解吸时间为1h。采用以上最佳富集条件,经过旋转蒸发,制得mb含量较高的粗品,其最大产量为13mg/L。并绘制mb标准曲线,用以计算发酵液中的mb含量,并测出mb富集的最终得率,约为72.22%。加对CuSO4前后mb粗粉制得的溶液进行HPLC分析,发现其中一个峰在加入CuSO4后变小,该峰可能为mb的色谱峰,其保留时间为31.468min。对mb抗氧化活性进行研究。首先,通过NBT还原法与SOD试剂盒法的比较,确定采用实验结果比较稳定的试剂盒法测定甲烷氧化菌素SOD活性。对大孔树脂富集前后甲烷氧化菌素的活性比较,发现富集过后的Cu-mb的SOD活性变小。在不同方法获得Cu-mb的SOD活性的比较中,发现在富集前加入CuSO4结合成Cu-mb的效果要好。采用DPPH法分析mb抗氧化活性,发现Cu-mb具有清除DPPH自由基的能力,而且结果亦显示富集前结合成Cu-mb的效果更好。而mb的自由基抑制率相对较小,不能确定其是否具有具有清除DPPH自由基活性。对甲烷氧化菌素的食用油脂抗氧化性能评价。结果显示Cu-mb对猪油、豆油这两种油脂具有抗氧化性(PF>1),但是相对比较低。而mb的PF值虽然PF>1,但近似等于1,故不能确定mb具有活性。