山茶籽油抗皮肤衰老作用及机制研究

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油茶(Camellia oleifera Abel.)作为我国特有的木本油料树种,因其茶籽油中含有大量的不饱和脂肪酸以及茶多酚、山茶苷、角鲨烯、生育酚类物质,使其在抗氧化、抑菌、抗炎、调节血脂、防辐射、锁水保湿、护肤养发等方面有显著的功效,可用作高级食用油、医药用油以及逐渐兴起的化妆品基底油。本课题基于D-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型,通过体内体外抗氧化能力的测评以及皮肤匀浆代谢组学的测试与分析,研究山茶籽油对衰老模型小鼠皮肤组织衰老的影响,并探讨其抗皮肤衰老的作用机理,为产业开发与应用提供一定的科学依据。研究主要分为以下三个部分:1.通过GC-MS首先对比了山茶籽原油与山茶花润肤油的脂肪酸成分组成,发现二者脂肪酸成分具有一致性,且油酸含量高。并通过清除(1,1-二苯基苦基苯肼)DPPH自由基和(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)ABTS自由基,结果发现,山茶籽原油清除DPPH自由基的IC50为24.72 g/l,清除ABTS自由基的IC50为12.03g/l;而山茶花润肤油清除DPPH自由基的IC50为9.12 g/l,清除ABTS自由基的IC50为6.57 g/l,对比得出山茶花润肤油比山茶籽原油具有更强的清除自由基的能力。2.通过注射不同剂量的D-半乳糖来建立D-半乳糖亚急性小鼠皮肤衰老模型,结果对比发现D-半乳糖最佳使用剂量为1000 mg/(kg·d)。以D-半乳糖亚急性衰老模型为基础,结合氧化自由基学说的理论支持,山茶籽原油和山茶花润肤油进行外涂干预,检测小鼠皮肤含水量、皮肤内源性生化指标以及组织形态的变化。结果显示:山茶籽原油组、山茶花润肤油组以及VE油组小鼠皮肤含水量分别达到61.44%、65.07%和63.46%,都显著高于模型组的含水量55.1%。按照山茶籽原油组、山茶花润肤油组以及VE油组的分组情况小鼠皮肤的超氧化物歧化酶(SOD)活性分别为54.65±6.72 U/mg prot、59.00±4.27 U/mg prot、63.28±6.85 U/mg prot显著高于模型组46.87±6.28 U/mg prot;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性分别为64.93±6.82 nmol/mg prot、72.04±7.39 nmol/mg prot、74.21±5.00 nmol/mg prot显著高于模型组44.50±4.56 nmol/mg prot;过氧化氢酶(CAT)活性分别3.06±0.58 U/mg prot、3.30±0.20 U/mg prot、4.04±0.49 U/mg prot显著高于模型组2.02±0.36U/mg prot。过氧化脂质产物丙二醛(MDA)含量山茶籽原油组(4.31±0.31 nmol/mg prot)、山茶花润肤油组(3.80±0.41 nmol/mg prot)以及VE油组(1.44±0.40 nmol/mg prot)都比模型组(6.80±0.76 nmol/mg prot)减少。羟脯氨酸(Hyp)含量山茶籽原油组(3.02±0.41 mg/g)、山茶花润肤油组(3.26±0.41 mg/g)以及VE油组(3.34±0.18 mg/g)都比模型组(1.99±0.28 mg/g)增加。另外,干预组小鼠皮肤组织形态得到改善,表皮、真皮厚度增加,胶原纤维比例增加。3.以GC-TOF/MS代谢组学方法为基础,对小鼠皮肤组织样本进行了分析检测,完成了从样品采集、平台分析、数据处理到生物学信息发掘的代谢组学分析流程。结果显示:体外干预能够调节D-半乳糖引起的机体代谢紊乱,所涉及的代谢通路是丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢以及亚油酸代谢。
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