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目的
研究血管内皮细胞生长因子VEGF与穿膜蛋白DLK1的表达与骨肉瘤患者的性别、年龄、病理分级、Enneking分期、病理分型、肿瘤的转移之间的关系,其中以“VEGF/DLK1两因子与骨肉瘤的转移以及两因子的相关性”为研究重点。为骨肉瘤病因的探讨、临床病情的判断及对骨肉瘤的防治提供理论依据。
方法
选取我院自1997年1月至2007年3月间手术切除、并经病理诊断确诊的骨肉瘤的标本,其中男性24例,女性18例。选取同期我院手术切除、并经病理诊断确诊的良性的骨软骨瘤10例。所有染色标本均有两位经验丰富的病理医师在双盲下分别计数。每张切片随机选取10个高倍镜视野(10x40),每个高倍视野下计数100个细胞。以染色强度评分:不着色为0分,着色浅为1分,着色适中为2分,着色深为3分。再以阳性细胞所占百分比评分:阳性细胞数≤15%为0分,阳性细胞占16%-30%为1分,阳性细胞占31%-50%为2分,阳性细胞占51%-75%为3分,阳性细胞>75%为4分。两项得分相乘为最后得分:0分为“-”,1-2分为“+”,6-8分为“++”,9-12分为“+++”。0分为染色阴性,1-12分为染色阳性。
应用微波SP-免疫组化法,检测42例骨肉瘤和30例骨软骨瘤VEGF和DLK1的表达,运用统计学SPSS14.0软件分析两因子表达间的相关性,并对VEGF和DLK1在不同临床、病理指标间的骨肉瘤表达差异性进行显著性分析。
结果
一.VEGF在42例骨肉瘤组织中VEGF阳性表达率为76.2%,统计学分析显示两组表达存在显著性差异,P<0.05。DLK1在42例骨肉瘤组织中DLK1阳性表达率为66.7%,统计学分析显示两组表达存在显著性差异,P<0.05。
二.VEGF在各病理分级(高、中、低分化)及Ermeking分期(Ⅰ-ⅡA期、ⅡB-111期)骨肉瘤组织中阳性表达差异有显著性(P<0.05),且随着病理分级和Enneking外科分期的升高,VEGF的阳性表达率也呈增强趋势。DLK1与病理分级(高、中、低分化)有关,在各病理分级的骨肉瘤组织中的阳性表达具有显著性差异(P<0.05),且随着病理分级的升高,DLK1阳性表达强度也随之增强。
三.VEGF表达与转移呈显著正相关性(r=0.6782p<0.05)。DLK1表达与转移呈显著正相关性(r=0.7643p<0.05)。
四.VEGF与DLK1有相关性,二者呈正相关(r=0.8957p<0.05)。
结论
一、VEGF、DLK1在骨肉瘤组织中的表达均高于骨软骨瘤组织中的表达,存在显著差异性;
二、VEGF、DLK1在发生转移的骨肉瘤组织中表达高于未发生转移的骨肉瘤组织,存在显著差异性,提示两者可以作为判断骨肉瘤是否发生转移的指标;
三、VEGF、DLK1在骨肉瘤组织中的表达存在正相关性,提示两者在骨肉瘤的发生发展中存在相互影响的机制,但其机制尚需进一步的研究。