以往的研究表明,机体免疫(包括细胞免疫和体液免疫)参与癫痫的发病,而且本实验室的杨茹博士在儿童癫痫-RE患者体内检测到Munc18抗体。为了研究Munc18蛋白的自身免疫能否够导致癫痫,以及Munc18自身免疫反应和Munc18抗体的作用及它们致癫机制。我们在Wistar大鼠上分别进行了自身免疫和注射抗体实验。在实验中分别使用行为观测、脑电记录、免疫组化、Western blot和活体微量透析等方法,探索Munc18蛋白的自身免疫与癫痫发作的关系。实验结果如下:第一部分Munc18蛋白自身免疫诱导癫痫的实验研究1.通过对大鼠进行Munc18蛋白的自身免疫,大鼠血清中检测到较高滴度的Munc18抗体。2.在Munc18蛋白自身免疫过程中,大鼠逐渐出现痫样行为和脑电的异常,实验组大鼠脑电总功率明显增加。3.用免疫组织化学的方法发现Munc18自身免疫大鼠的海马CA3区Munc18蛋白含量显著下降。4.用高效液相色谱技术检测自身免疫大鼠海马的微透析液。结果表明Munc18自身免疫后海马中甘氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸含量显著下降。第二部分脑内注射Munc18抗体诱导痫样发作的实验研究1.通过在大鼠海马中注射Munc18抗体,大鼠逐渐出现痫样行为和痫样的脑电异常。2.免疫组织化学方法观察到在Munc18抗体注射的动物海马中,Munc18