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目的:本研究对我院小儿重症病房(简称小儿ICU,包含了新生儿重症监护病房(Neonatal intensive care unit,NICU)以及儿童重症监护室(Pediatric intensive care unit,PICU))感染肺炎克雷伯杆菌的患儿临床资料进行分析,同时对临床分离的肺炎克雷伯杆菌进行最低抑菌浓度及耐药性分析,并结合临床资料进一步探讨感染产超广谱β内酰胺酶(Extended spectrumβ-lactamases,ESLBs)肺炎克雷伯杆菌的相关危险因素等。此外,本文还会从分子生物学水平对临床分离的肺炎克雷伯杆菌菌株进行耐药基因的研究分析,旨在探讨宁波地区小儿ICU中肺炎克雷伯杆菌感染临床及耐药基因特征,为临床合理用药及院内感染控制提供相关依据。方法:(1)回顾性分析我院小儿ICU2012年1月-2017年12月来感染肺炎克雷伯杆菌患儿的病例信息及相关临床资料,并对年龄、性别、出生体重、实验室检查等15种临床相关因素进行单因素分析及Logistic回归多因素分析,探讨其危险因素。(2)用VITEK-60全自动微生物分析仪进行细菌培养及鉴定。用美国CLSI推荐的纸片扩散法确证产ESBLs菌株。(3)采用微量肉汤稀释法,检测ESBLs对氨苄西林等24种抗生素的最低抑菌浓度。(4)将ESBLs阳性的肺炎克雷伯杆菌接种在MH琼脂平板,共培养18-24小时,并用OMEGA Bacterial DNA Kit试剂盒提取DNA。(5)采用聚合酶链反应(PCR)法检测耐药基因,并进行分析。结果:(1)2012年-2017年期间我院小儿ICU共检出肺炎克雷伯杆菌共356例,各年度在总菌株中的构成比分别是11.8%(37/314)、16.0%(51/319)、14.1%(47/333)、18.2%(66/362)、17.6%(70/398)、18.4%(85/462)。(2)剔除重复菌株及定植菌株后,2012年-2017年共检出263株肺炎克雷伯杆菌,主要来自呼吸道标本,产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染组的呼吸道标本占93.5%,痰液标本占比为86%。(3)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染组基础疾病主要为先天性心脏病41例,贫血72例,呼吸窘迫症49例,肺炎57例。(4)婴儿期除新生儿外(28天-1岁)年龄段产ESBLs分布的比例较高。(5)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染组在6、7、10月份的感染率较其他月份较高,分别为18.3%,15.1%,10.8%。(6)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染组死亡病例8例,占比8.6%,存活71例,占比76.1%,放弃6例,占比6.5%,转院8例,占比8.6%。(7)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染组男性58例,女性35例,男性较女性患儿人数多,产ESBLs组肺炎克雷伯杆菌感染组中早产儿为63例,占比67.7%,半年内住院患儿共27例,占比29%。(8)Logistic逐步回归分析结果显示,使用胃肠减压管、先前使用三代头孢、贫血患儿感染ESBLs的可能性更大。(9)肺炎克雷伯杆菌对24中抗生素MIC结果均有不同程度的耐药,对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉的耐药率最高,达90%以上;对氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢曲松及四环素的耐药率亦>50%;对于阿米卡星、替加环素、呋喃妥因的敏感率为100%。(10)ESBLs肺炎克雷伯杆菌共扩增了12种耐药基因,其中6种耐药基因有不同程度检出,耐药基因shv检出率高达86.7%。结论:(1)连续六年我院小儿ICU内肺炎克雷伯杆菌检出最高,构成比占所有菌株第一位,值得重视。(2)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌所致的感染与此前住院病史、电解质紊乱、联合用药等多项因素有关,其中使用胃肠减压管、感染前使用三代头孢菌素、贫血均为其独立危险因素。(3)产ESBLs肺炎克雷伯杆菌在本地区细菌耐药情况严重,多重耐药模式复杂。需重视定期监测肺炎克雷伯杆菌的定植及感染情况,意义重大。