论文部分内容阅读
荷叶为睡莲属植物莲(NelumbonuciferaGaertn.)的干燥叶片,我国南北方均有栽培,是一种既是食品又是药品的天然植物原料,其中含有生物碱及黄酮类化合物等多种功能成分。多年的临床经验表明:荷叶具有降脂减肥功效,其主要活性成分为黄酮和生物碱类物质。目前其降脂减肥的机理还不十分清楚。本文旨在研究荷叶总生物碱及黄酮类化合物对脂肪酶的抑制作用及机理,探讨其提取工艺并进行含量测定。
1.荷叶黄酮类化合物的提取分离。实验采用乙醇为溶剂提取荷叶黄酮类化合物,结果显示60%乙醇的提取效果优于95%乙醇。使用经典聚酰胺柱层析对提取物进行纯化,定性实验显示纯化后的提取物中主要为黄酮类物质,可能含有少量皂甙。以芦丁为对照品,分光光度法测定提取物中总黄酮含量为71.11%,荷叶中总黄酮的含量为2.67%。
2.荷叶总生物碱的提取。实验采用95%乙醇及pH3~4盐酸水溶液作为荷叶总生物碱的提取溶剂。实验结果显示,95%乙醇提取物得率比酸水提取物得率略高,而且乙醇提取物对脂肪酶的抑制作用大于酸水提取物。定性实验显示,提取物中主要为生物碱类物质,同时还含有少量蒽醌类。以荷叶碱为对照品,分光光度法测得乙醇提取物中总生物碱含量为40.1%,在荷叶中占0.44%。
3.荷叶总生物碱及黄酮类化合物对脂肪酶的抑制作用。采用体外酶抑制法研究了荷叶总生物碱及黄酮类化合物对脂肪酶的抑制作用。结果表明:荷叶总生物碱及黄酮类化合物对脂肪酶都有一定的抑制作用,且生物碱对脂肪酶的抑制效果比黄酮显著。首次研究了荷叶总生物碱对脂肪酶的抑制类型及作用机理。研究结果表明抑制剂并不直接与酶分子作用,而是间接改变底物乳化液来阻碍底物与酶的结合,从而达到抑制作用。Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征表明,荷叶总生物碱对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性抑制。