猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)引起的一种高度接触性传染病,死亡率高,危害严重,被列为动物A类传染病。猪瘟病毒是隶属黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestiyirus)的单股RNA病毒,其中,猪瘟病毒E2、E0蛋白是可诱导机体产生中和性抗体的保护性蛋白,E0是唯一可分泌到猪瘟病毒感染细胞培养液上清中的糖蛋白。编码E0的氨基酸序列要更为保守,研究E0蛋白对CSF的防制具有重要意义。本论文主要进行了以下几方面的研究：一：猪瘟病毒E0蛋白在毕赤酵母表达系统中的表达与鉴定。利用基因工程手段,成功构建能够在毕赤酵母GS115菌株中表达E0蛋白的重组质粒pPIC9K-E0,通过电转化将其转化到GS115中,通过对诱导时间、诱导温度以及甲醇的诱导浓度进行优化,最终确定了28℃诱导温度下甲醇终浓度为0.5%诱导120h可以使E0蛋白的产量达到最高。使用猪瘟病毒阳性血清对粗提后的E0蛋白进行Western blot鉴定和间接ELISA鉴定,鉴定结果表明,利用酵母菌株表达的重组E0蛋白具备良好的反应原性,可以作为包被原对猪瘟病毒的E0抗体进行检测。二：猪瘟病毒E0蛋白在PK-15细胞中的表达与鉴定。成功构建能够在猪源性PK-15细胞中表达目的蛋白的重组质粒PEGFP-E0,并通过化学转染的方法将其插入PK-15细胞中,实现了猪瘟病毒E0蛋白在PK-15细胞中的表达。为进一步大量表达纯化E0糖蛋白、研究其生物学功能和活性奠定了基础。