千金子为大戟科(Euphorbiaceae)大戟属(Euphorbia Linn)植物续随子(Euphorbia Lathyris L.)的干燥成熟种子,主要功效为逐水消肿、破血消瘤。二萜醇酯类化合物是千金子中的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗肿瘤多药耐药、祛斑美白等药理作用。截至目前,关于千金子中二萜醇酯类化学成分提取分离的文献较多,但有关千金子二萜醇酯类化合物的含量测定以及千金子化学成分药理作用研究尚存在许多空白。为深入研究千金子的药效物质基础并完善其质量标准,进而开发其新的医药用途,本文对千金子中的二萜醇酯类化学成分进行了进一步的提取分离与结构鉴定,并研究了二萜醇酯类化学成分的新的含量测定方法。首先,利用硅胶柱层析、ODS柱层析、制备色谱等分离方法并结合NMR、MS等波谱学手段,从千金子中分离鉴定了 13个二萜醇酯类化合物单体。其中1个为新化合物(7-羟基续随子醇-5,7,15-三乙酸-3-苯甲酸酯),其余12个为已知化合物,它们分别是5,1 5-diacetoxy-3-nicotinoyloxy-6,17-epoxylathyra-12-en-14-one,jolkinol-5β,6β-oxide-3-nicotinoyl-15-acetylester,(12E,2S,3S,4R,5R,6R,9S,11S,15R)-15-acetoxy-5,6-epoxylathyra-12-en-3-ol-14-one 和大戟因子 L7b、L11、L12、L15、L18、L23、L24、L25、L29。在上述化学成分研究的基础上,本文首次采用基质固相分散-高效液相色谱法,测定了千金子中5种二萜醇酯类化合物,即大戟因子L7b、L8、L11、L15、L23的含量。通过单因素考察,确定了该方法的最优实验条件为:中性氧化铝为固相分散剂,用量为1.0 g,甲醇为洗脱剂,洗脱体积为20 mL。在此条件下,大戟因子L7b、L8、L11、L15、L23分别在0.002～0.496 mg/mL范围内,峰面积y(S均)与进样浓度x(C)的线性关系良好。五种二萜醇酯类化合物的检测限在0.10～0.32 ng范围之间,精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.0%(n=6),加样回收率范围在96.5%～104.9%之间,其RSD值均小于3.0%(n=6)。结果表明,该方法能有效地克服千金子油对目标物提取的干扰,具有提取率高、灵敏度高、准确度好、精密度高等特点。含量测定结果表明,千金子中大戟因子L7b、L8、L11、L15、L23 的含量分别为 0.940～1.305 mg/g、0.312～0.394 mg/g、0.261～1.120 mg/g、0.051～0.120 mg/g和0.113～0.131 mg/g,五种二萜醇酯类化合物含量之和为1.677～3.070 mg/g。最后,本文利用分散液-液微萃取结合高效液相色谱法,首次测定了以千金子作为处方药材之一的复方制剂紫金锭片剂中6种二萜醇酯类化合物,即大戟因子L1、L2、L3、L7b、L8、L11的含量。通过单因素考察,确定了该方法最优的实验条件为:样品用量为5.0 g,600 μL三氯甲烷为萃取溶剂,200 μL无水乙醇为分散剂,PH=7,超声4 min,离心8 min(5000 r/min)。在此条件下,大戟因子L1、L2、L3、L7b、L8、L11在 1.50～499.34 μg/mL 范围内,峰面积 y(S 均)与进样浓度x(C)的线性关系良好。6种目标物的检测限在0.19～0.65 μg/mL之间,日间和日内精密度RSD值在0.4～2.1%之间,重复性和稳定性的RSD值均小于4.0%(n=6),加样回收率在94.7%～106.6%之间,其RSD值在3.2%～4.2%之间(n=6)。结果表明,该方法能有效地从化学成分组成复杂的复方制剂片中萃取并富集二萜醇酯类化合物,其萃取效率高并具有快速、灵敏度高、精密度好、准确度高等特点。含量测定结果表明,紫金锭中大戟因子L1、L2、L3、L7b、L8、L11 的含量分别为 161.52 μg/g、24.83 μg/g、126.60 μg/g、34.68 μg/g、7.32 μg/g和50.05 μg/g,六种二萜醇酯类化合物含量之和为405.00 μg/g。综上所述,本文从千金子中分离鉴定了 1个新化合物和12个已知的二萜醇酯类化合物。在此基础上首次建立了同时测定千金子中5种二萜醇酯类化合物的基质固相分散-高效液相色谱法以及同时测定中成药紫金锭片剂中6种二萜醇酯类化合物的分散液液微萃取-高效液相色谱法两种新的分析方法。本文的研究结果不仅丰富了千金子中二萜醇酯类成分的种类和数量,而且为千金子及其复方制剂质量标准的完善及其药效物质基础的深入研究提供了新的科学依据。