【摘 要】
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烟草甲具有适应能力强、食性广泛的特点,危害和污染各个加工阶段的烟草产品,其幼虫通过取食烟叶,造成烟叶穿孔破碎,严重影响烟叶品质。如今对烟草甲的防治主要依靠化学药剂进行熏蒸处理,但随着烟草甲对化学药剂抗性的逐渐增强,其熏蒸防治效果大幅度降低。化学熏蒸极易造成环境污染。因此,迫切需要寻找对环境友好且不易产生抗性的防治药剂,以替代化学药剂熏蒸带来的环境污染及食品安全等问题。目前,球孢白僵菌（Beauve
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烟草甲具有适应能力强、食性广泛的特点,危害和污染各个加工阶段的烟草产品,其幼虫通过取食烟叶,造成烟叶穿孔破碎,严重影响烟叶品质。如今对烟草甲的防治主要依靠化学药剂进行熏蒸处理,但随着烟草甲对化学药剂抗性的逐渐增强,其熏蒸防治效果大幅度降低。化学熏蒸极易造成环境污染。因此,迫切需要寻找对环境友好且不易产生抗性的防治药剂,以替代化学药剂熏蒸带来的环境污染及食品安全等问题。目前,球孢白僵菌（Beauveria bassiana）、金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）、蜡蚧轮枝菌（Verticilliu mfungus）等具有广谱杀虫作用的昆虫病原真菌已经在国内外商品化,并在重要农林害虫防治中取得了较为明显的效果。但国内外有关昆虫病原真菌防治烟草甲的研究报道较少。本研究从田间自然罹病小菜蛾虫体上分离了一株球孢白僵菌（B.bassiana）菌株,编号为Bb05。将Bb05与实验室保存的其他昆虫病原真菌菌株进行毒力及生长状态进行比较,评价了其在烟草甲绿色防控上的应用潜力;为探究Bb05对烟草甲的侵染机制,本研究对烟草甲的不同虫态进行了毒力测定,同时利用多种显微镜观察力菌株Bb05侵染烟草甲的过程;为提高菌株Bb05对烟草甲的毒力与实仓应用的防治效果,将其与乙基多杀菌素进行复配增效实验与拮抗性测试试验。本研究的主要成果如下:1.对烟草甲高毒力昆虫病原真菌的筛选:在SDAY培养基上接种10株昆虫病原真菌,培养的10株菌株形态基本相似,其中菌株Bb05与菌株Bbr81的生长速率与产孢量较好,接种15 d的菌落直径为50.37mm与49.10mm,产孢量分别为6.98×107和7.13×107孢子/cm2。对烟草甲2龄幼虫致病力最高的是菌株Bb05,处理后10 d烟草甲的死亡率为77.78%,其LT50为7.60 d,小于其他菌株;其次为菌株Bbr81,处理后10 d烟草甲的死亡率为74.44%,LT50为8.18 d,显著高于其他菌株。进而毒力测定发现,菌株Bb05的LC50为2.88×106孢子/m L,菌株Bbr81的LC50为4.23×106孢子/m L。2.Bb05菌株对不同虫态烟草甲的毒力测定及侵染过程观察:Bb05对不同虫态烟草甲的毒力为:烟草甲成虫>2龄幼虫>蛹。接种Bb05孢子悬浮液后,第2 d烟草甲幼虫行动开始迟缓,接着在足、头部及虫体体侧气门处出现菌丝。第4 d虫体逐渐变为浅紫色,第9 d虫体皱缩死亡,白色菌丝布满虫体表面。在扫描电镜下观察发现,接菌1 d后,Bb05孢子附着在烟草甲体表的凹陷处,分泌物质粘附并溶解表皮;接菌3 d后,孢子开始萌发,穿透体壁侵入烟草甲体内;接菌9 d后,菌丝穿出体表,布满整个虫体,并产生大量分生孢子。3.Bb05与乙基多杀菌素的相容性及二者联用对烟草甲的防效:在培养基中加入不同浓度的乙基多杀菌素,接入Bb05（直径5mm菌碟）进行培养。培养第9 d,乙基多杀菌素8000倍液对Bb05菌落生长的抑制率仅为0.69%,表明两者相容性较好。将乙基多杀菌素（8000倍液）与Bb05孢子悬浮液（1.0×108孢子/m L）单独或联合使用对烟草甲2龄幼虫进行毒力测定。结果表明,处理7 d后,单独使用乙基多杀菌素和Bb05孢子悬浮液造成的烟草甲死亡率分别为100.00%和35.56%,而乙基多杀菌素和Bb05联合使用后第5 d即可造成烟草甲100%死亡,表明乙基多杀菌素和Bb05具有协同增效作用。4.Bb05与烟草甲性诱剂联用对烟仓中烟草甲成虫的防效:将烟草甲性诱剂诱芯与带有Bb05孢子悬浮液（1.0×108孢子/m L）的无纺布条装入本实验室改进的烟草甲诱捕器中,放置于烟仓。诱捕器共放置10 d。每天调查诱捕器中烟草甲虫数,并将诱集到的烟草甲成虫收集并记录死亡数。结果表明,施用烟草甲性诱剂与菌株Bb05孢子悬浮液（1.0×108孢子/m L）10 d,对烟草甲成虫的防治效果为76.89%,初步证明了昆虫病原真菌在仓储条件下应用的可能。
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