日粮中过量的硒对新西兰兔抗氧化能力、毛囊结构及相关蛋白表达的影响

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硒是人和动物健康生长必需的微量元素之一,适量的硒能调节生长、提高生产性能和集体免疫力、抗氧化、抗应激、延缓衰老及拮抗某些毒物或有毒元素。而硒,特别是无机硒源的硒,其安全范围很窄,稍微过量就会引起动物急性或慢性中毒。本研究是基于课题组在家兔规模养殖过程中发现的一个实际问题而展开的。日粮中添加无机硒引发兔场饲养的新西兰兔出现生长迟缓和大面积的被毛稀疏,针对这一现象,本文主要通过检测日粮和兔体内的硒水平,兔体的抗氧化能力以及兔子皮肤和毛囊结构变化等指标来探讨过量的硒对新西兰兔的生长尤其是被毛生长发育的影响机理,旨在为家兔饲料中硒的安全添加提供一定的参考。试验1、日粮中过量的硒对新西兰兔全血及皮肤硒含量的影响从饲养到30 d的20只(每组各10只)新西兰兔的耳缘静脉采血,剪毛取皮肤组织,每组分别取适量的全血和皮肤样本(n=10)利用石墨炉法检测硒含量。结果表明:添加硒水平0.16 mg/kg亚硒酸钠组(sodium selenite,SS组)的新西兰兔血液中硒含量比对照组(control,C组)高40.32%,P= 0.043(P<0.05);C组新西兰兔皮肤组织中硒含量比SS组高5.64%,但差异不显著(P>0.05)。试验2、日粮中过量的硒对新西兰兔皮肤组织毛囊结构的影响对饲养到30 d的20只(每组各10只)新西兰兔的背部剪毛,每只兔取两侧肩胛部位皮肤组织2块,平铺固定于带孔木板上,固定于伯恩氏液中8-24 h,然后脱水、透明、包埋,制成4 μm的切片,HE染色后光学显微镜下观察皮肤毛囊组织结构的变化。结果表明:C组新西兰兔毛囊群结构排列整齐,一个初级毛囊周围环绕数个次级毛囊,而且毛囊横切面呈正常椭圆形;SS组新西兰兔毛囊群结构排列杂乱无章,初级毛囊和部分次级毛囊的横切面不呈正常的椭圆形。试验3、日粮中添加过量的硒对新西兰兔机体抗氧化能力的影响从饲养到30 d的20只(每组各10只)新西兰兔耳缘静脉采血并离心制备血浆,剪毛取皮肤组织。每组分别取适量的血浆和皮肤样本(n=10),依照试剂盒的说明进行谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)活性、超氧化物歧化(Superoxide Dismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量和总抗氧化能力(T-AOC)的测定。结果表明:与C组比较,SS组新西兰兔的皮肤组织中GPx(P<0.01)活性、SOD(P<0.05)活性、T-AOC(P<0.01)总抗氧化能力分别显著或极显著降低,而MDA(P<0.05)含量显著升高;与C组比较,SS组新西兰兔的血浆中 GPx(P<0.01)活性、SOD(P<0.01)活性、T-AOC(P<0.01)总抗氧化能力分别显著或极显著降低,而MDA(P<0.01)含量极显著升高。试验4、日粮中添加过量的硒对新西兰兔皮肤组织中GPx4和EGFR蛋白表达的影响对饲养了 30 d的20只(每组各10只)新西兰兔的背部剪毛,每只兔取背部相同部位皮肤组织3块,应用蛋白质印迹(Western blotting)方法测定皮肤组织中GPx4和EGFR蛋白的表达水平。结果表明:与C组相比较,SS组新西兰兔皮肤中GPx4和EGFR蛋白的表达量显著降低。
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