噬菌体天然抗体库通常具有库容大、多样性好的优势,可广泛用于人源靶点治疗及诊断抗体筛选。但由于天然抗体库中抗体序列多来自IgM,未经刺激成熟,体内亲和力较IgG型偏弱。将获得的scFv序列组装至IgG全长后,亲和力通常为10^-7至10^-8 M级,难以满足对亲和力要求较高时的需求。本论文通过针对不同的靶点的结构特征、项目需求进行抗体淘选和筛选实验。首先,抗原分别选取细胞表面胞外区蛋白、多跨膜蛋白、人源抗原和鼠源抗原,进行直接法和间接法Elisa实验,优化抗体的检测方法。其次,淘选阶段选取不同的结合形式,分别选取固相筛选、液相筛选、细胞筛选和高通量仪器进行淘选,并选取不同的抗原筛选起始浓度,对比Output抗体序列的数量和阳性率,优化淘选方法。其三,在筛选阶段通过优化Elisa形式、缓冲液类型和试剂浓度等方式,增加抗原与噬菌体颗粒之间的检测窗口,提高阳性数值,减少假阳性。通过这一系列的优化手段,最终获得多个满足需求的高亲和力抗体(10^-9至10^-1010 M)。这些淘选和筛选方法的优化研究,有利于提高最终抗体的阳性率和多样性,为利用噬菌体展示抗体库高通量筛选获得目标抗体提供了方法学上的参考。