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目的:重型创伤性颅脑损伤是临床上常见危急重症,致死率高,经抢救存活的患者大多伴有严重神经功能障碍,生活质量明显降低。重型颅脑损伤后,大脑受到挤压、剪切、牵拉、甩尾等力量的综合破坏作用,导致中枢神经系统机械性损伤及继发性损害。及时有效外科手术治疗和药物治疗虽然可以挽救部分重症患者的生命,但是如何提高存活患者的行为能力、认知能力,减轻后遗症是临床面临的一大难题。高压氧(HBO)疗法是使患者在高于一个大气压的环境下吸高浓度的氧,其作为一种安全有效的治疗方法,正逐步被临床医生所认识。本研究旨在从HBO治疗脑损伤的作用效果及机制角度出发,观察HBO治疗对侧位液压冲击脑损伤大鼠的行为能力、学习能力和记忆能力的影响,并观察HBO治疗对脑内神经生长因子(NGF)表达的影响,为临床应用HBO治疗颅脑损伤提供依据。
方法:实验动物选取雄性Wister大鼠,应用液压撞击仪制作侧位液压冲击脑损伤大鼠模型。实验分为两个部分,第一部分通过HBO对脑损伤大鼠运动、学习、记忆的影响来探讨其作用效果。大鼠随机分成3组:脑损伤HBO组,脑损伤对照组、正常对照组。于造模后24h开始行HBO治疗,治疗压力为0.25MPa,时间为1h,每日一次,连续治疗10d。术后第6-10d连续应用Morris水迷宫实验测试并比较大鼠的运动、学习、记忆能力恢复情况。第二部分通过HBO对脑损伤大鼠脑内NGF表达的影响来探讨HBO治疗的可能机制。实验大鼠分成脑损伤组及正常对照组。各组内再分别分3组进行HBO暴露、高压空气(HBA)暴露及常压空气暴露,每组8只。5 d后断头取脑,行脑组织切片,应用免疫组化方法检测NGF在损伤区周围皮层的表达。
结果:
1.逃避潜伏期:连续5d的Morris水迷宫定位航行实验中,每日各组间逃避潜伏期比较结果均为正常对照组<脑损伤HBO组<脑损对照组(P<0.05)。
2.游泳平均速度:在定位航行实验中,各组大鼠5d测试中游泳的总平均速度比较:脑损伤HBO组、脑损伤对照组均慢于正常对照组(P<0.05);脑损伤HBO组与脑损伤对照组无显著差别(P>0.05)。
3.穿越目标平台次数:在Morris水迷宫空间探索实验中,大鼠经过目标平台位置的次数为正常对照组>脑损伤HBO组>脑损伤对照组(P<0.05)。
4.目标象限搜索时间:在空间探索实验中,大鼠在目标象限内搜索隐蔽平台的时间比较为正常对照组>脑损伤HBO组>脑损伤对照组(P<0.05)。
5.NGF表达:脑损伤HBO组损伤区周围皮层表达的NGF免疫阳性细胞数33.48±1.86,脑损伤对照组损伤区周围皮层表达的NGF免疫阳性细胞数20.28±1.40,两者比较有显著差异(P<0.01),正常对照组NGF免疫阳性细胞数仅少量表达。
结论:HBO对脑损伤大鼠学习能力、记忆能力的恢复有促进作用,短期内对大鼠运动能力影响不大。提示HBO治疗可作为一种有效的方法在颅脑损伤的临床治疗方面应用。大鼠脑损伤后可以提高损伤区周围皮层NGF的表达,HBO可以进一步提高NGF的皮层区表达。表明HBO可通过提高内源性NGF表达来促进中枢神经系统损伤神经元的修复。