黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）是研究先天免疫调控机制的重要模式生物之一。果蝇的先天免疫主要包括两条重要的信号通路Imd信号通路和Toll信号通路,且这两条信号通路分别与哺乳动物的TNF-α及TLR信号通路有着良好的同源性。所以对果蝇先天免疫的研究能够为深入理解哺乳动物先天免疫的调节机制提供借鉴意义。研究表明microRNA可以在基因转录后水平参与基因的表达调控,进而在免疫的调节过程中扮演着重要角色。探究microRNA在免疫通路中发挥的调控作用,将为我们深入理解昆虫及哺乳动物的免疫调控机制,阐述哺乳动物免疫疾病的发病机理及研究治疗方法具有重要意义。结合本课题组前期工作,通过转录组测序数据及实验验证筛选出与果蝇免疫相关的miR-190,通过深入研究后证明miR-190可以参与果蝇Imd先天免疫通路的负调控。本论文研究内容如下:1.以革兰氏阴性菌大肠杆菌（E.coli）刺激后的野生型果蝇(w1118)作为实验组,并以PBS刺激的野生型果蝇作为对照组,通过实时荧光定量PCR方法（qRTPCR）检测大肠杆菌（E.coli）刺激后miR-190的表达变化情况。结果表明,miR-190参与果蝇的先天免疫应答;2.利用miRanda、Target Scan软件对miR-190的靶基因进行预测,取交集发现miR-190可以靶向Imd通路中的转录共激活因子Tab2及Imd通路激活子akirin;3.利用大肠杆菌（E.coli）对w1118、miR-190高表达、miR-190KO、miR-190/miR-190sponge共表达果蝇株系进行刺激,分别在0h、3h、6h、12h、24h、48h提取RNA,实时荧光定量法对下游抗菌肽及靶基因进行检测。动物实验验证miR-190可以参与果蝇的免疫应答以及miR-190与靶基因Tab2、akirin的调控关系。结果表明,miR-190可以通过抑制Tab2及akirin的表达参与果蝇的先天免疫调控;4.通过构建pAc-miR-190、pAc-LUC-Tab2-RA/RB/RC-3’UTR、pAc-LUC-Tab2-3’UTR mutation、pAc-LUC-akirin-/RB/RC/RD/RF-3’UTR及pAc-LUC-akirinRA/RE-3’UTR质粒,采用双荧光素酶报告系统细胞实验验证miR-190与靶基因Tab2及akirin的直接靶向关系。结果表明miR-190与靶基因Tab2存在直接的调控关系。5.通过注射致死菌阴沟杆菌（E.cloacae）观察高表达miR-190,miR-190KO果蝇株系生存情况。结果表明,miR-190高表达果蝇株系死亡率上升,而miR-190KO型果蝇株系表现出较低的死亡率。进一步证明miR-190在免疫通路中发挥着重要作用。