白头叶猴的个体识别及亲缘关系的研究

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白头叶猴(Trachypithecus leucocephalus)是世界级的珍稀濒危野生动物和国家一级保护动物,被WCMC列为高度濒危物种,2002年被世界动物保护组织列入25种首要保护的灵长类之一。其种群数量约600只左右[4],生存条件不容乐观。通过近年来的研究和报道该动物已经引起人们的关注和兴趣。如何保护该物种成为今后研究的重点。本论文的主要目是运用分子粪便学方法从白头叶猴的粪便中抽提出白头叶猴的高质量的DNA,并以此为材料通过分析白头叶猴的5个DNA微卫星座位的遗传多态性来获得白头叶猴之间的遗传关系,以及白头叶猴5个微卫星基因座的各项遗传学数据,从而对白头叶猴进行个体识别和亲缘关系的研究,为该物种今后的研究和保护提供依据。在研究过程中通过采用高效的粪便DNA提取技术,从白头叶猴的粪便中提取出高质量的白头叶猴DNA,成功地用于微卫星位点PCR扩增。从而最大限度地减小了采样对野生动物的伤害和干扰。同时,本研究从32对微卫星引物中筛选出5对多态性好的引物以抽提的白头叶猴DNA为模板进行了特异性扩增。并用SRY引物进行了性别判断。随后用CURVUS2.0软件分析了扩增结果,并对采集的粪样进行了个体识别和亲子鉴定。结果表明:1、所筛选的5对微卫星引物具有较好的多态性,在46个白头叶猴个体中扩增出45个等位基因,其中D10S678最多,有11个等位基因。根据位点的等位基因频率,计算了各个位点的基因杂合度、多态信息含量。基因杂合度平均为0.722;多态信息含量平均为0.687,表明5个位点大多具有高度多态性,而且种群具有较好的遗传多样性。2、采自广西扶绥、崇左的5群72个粪样来自46个不同的白头叶猴个体。其中f群13个个体;n群14个个体;y群4个个体,而且该群为全雄群;w群7个个体;q群8个个体。通过亲权鉴定我们发现全雄群y群的两个个体来自f群;n群的一个个体来自f群。群与群之间存在基因交流情况。通过以上工作为今后进一步进行遗传分析和研究保护白头叶猴打下了基础。
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